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龍圖騰網恭喜重慶安賽搏新材料技術有限公司申請的專利一種同時提高高山火絨草愈傷組織的總黃酮和多種有機酸的調控方法獲國家發明授權專利權，本發明授權專利權由國家知識產權局授予，授權公告號為：CN109593705B 。

龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-05-30發布的發明授權授權公告中獲悉：該發明授權的專利申請號/專利號為：201811628974.9，技術領域涉及：C12N5/04；該發明授權一種同時提高高山火絨草愈傷組織的總黃酮和多種有機酸的調控方法是由王鵬;劉水燕;何俊雄;侯蒙蒙;張衛;譚光偉設計研發完成，并于2018-12-29向國家知識產權局提交的專利申請。

本一種同時提高高山火絨草愈傷組織的總黃酮和多種有機酸的調控方法在說明書摘要公布了：本發明公開了一種同時提高高山火絨草愈傷組織和懸浮培養細胞的總黃酮和多種有機酸的調控方法。本發明主要采用特定的調控方案，同時添加2種協同使用效果優良的誘導劑，AgNO3水溶液和水楊酸（SA）95%乙醇溶液，可以使高山火絨草愈傷組織和懸浮細胞的總黃酮、綠原酸、火絨草酸含量均得到提高。按本專利所述培養策略可以使高山火絨草細胞系在0.1?200L規模均保持穩定的生長和黃酮類及多種有機酸類次生代謝物的表達。

本發明授權一種同時提高高山火絨草愈傷組織的總黃酮和多種有機酸的調控方法在權利要求書中公布了：1.一種同時提高高山火絨草愈傷組織和懸浮培養細胞的總黃酮和多種有機酸的調控方法，所述的有機酸指的是：綠原酸、火絨草酸、二咖啡酰奎寧酸，其特征在于按如下的步驟進行：（1）高山火絨草愈傷組織懸浮培養：選取質地疏松、顏色淺黃色至黃色、生長速度快的高山火絨草愈傷組織，按0.1-2g10mL比例，接入懸浮培養基CM2，置于搖床100-115rpm培養，溫度保持20-25℃，按5-15g100mL濕重比例每7d繼代一次，生長速度2-3倍7d；所述的懸浮培養基CM2指的是：B5+1-2mgL2,4-D+30gL蔗糖+0.1mgLL-谷氨酰胺+0.2mgL水解乳蛋白或B5+1-2mgL2,4-D+0.1-0.2mgL6-BA+30gL蔗糖+0.1mgLL-谷氨酰胺+0.2mgL水解乳蛋白，pH5.8-6.0；（2）代謝調控工藝：向已生長7天的高山火絨草懸浮培養物中以無菌方式加入0.22μm微孔濾膜過濾除菌的50mMAgNO3水溶液和500mM水楊酸SA，95%乙醇溶液，使其終濃度分別達到2.5-15μMAgNO3和20-100mMSA；繼續按原培養方案培養2-5天收獲；或（1）高山火絨草愈傷組織懸浮培養：選取質地疏松、顏色淺黃色至黃色、生長速度快的高山火絨草愈傷組織，按0.1-2g10mL比例，接入懸浮培養基CM2，置于搖床100-115rpm培養，溫度保持20-25℃，按5-15g100mL濕重比例每7d繼代一次，生長速度2-3倍7d；所述的懸浮培養基CM2指的是：B5+1-2mgL2,4-D+30gL蔗糖+0.1mgLL-谷氨酰胺+0.2mgL水解乳蛋白或B5+1-2mgL2,4-D+0.1-0.2mgL6-BA+30gL蔗糖+0.1mgLL-谷氨酰胺+0.2mgL水解乳蛋白，pH5.8-6.0；（2）高山火絨草愈傷組織的一次性生物反應器培養：選取狀態一致的已培養7d的懸浮培養材料，向5L一次性生物反應器中接入1500-2500mL培養物和除菌處理的2500-3500mL懸浮培養基CM2使終體積為5000mL，振頻為9.5次min，通空氣為0.1m3h，培養7d；繼代時，將培養物接入新的一次性生物反應器，加入2-4倍體積的懸浮培養基CM2，振蕩并通氣培養，振蕩頻率范圍為2-15次min，通氣量為0.05-0.3m3h；所述的懸浮培養基CM2指的是：B5+1-2mgL2,4-D+30gL蔗糖+0.1mgLL-谷氨酰胺+0.2mgL水解乳蛋白或B5+1-2mgL2,4-D+0.1-0.2mgL6-BA+30gL蔗糖+0.1mgLL-谷氨酰胺+0.2mgL水解乳蛋白，pH5.8-6.0；（3）代謝調控工藝：向已生長7天的高山火絨草懸浮培養物中以無菌方式加入0.22μm微孔濾膜過濾除菌的50mMAgNO3水溶液和500mM水楊酸SA，95%乙醇溶液，使其終濃度分別達到2.5-15μM，AgNO3和20-100mMSA；繼續按原培養方案培養2-5天收獲。

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