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龍圖騰網(wǎng)恭喜上海逆耳生物科技有限公司申請(qǐng)的專利植物單細(xì)胞懸液、制備方法及其應(yīng)用獲國(guó)家發(fā)明授權(quán)專利權(quán)，本發(fā)明授權(quán)專利權(quán)由國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局授予，授權(quán)公告號(hào)為：CN119162078B 。

龍圖騰網(wǎng)通過(guò)國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局官網(wǎng)在2025-05-23發(fā)布的發(fā)明授權(quán)授權(quán)公告中獲悉：該發(fā)明授權(quán)的專利申請(qǐng)?zhí)?專利號(hào)為：202411380340.1，技術(shù)領(lǐng)域涉及：C12N5/04；該發(fā)明授權(quán)植物單細(xì)胞懸液、制備方法及其應(yīng)用是由高翔;嚴(yán)冰冰;蔣偉;蘇小螢;黎蘭;趙清設(shè)計(jì)研發(fā)完成，并于2024-09-30向國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局提交的專利申請(qǐng)。

本植物單細(xì)胞懸液、制備方法及其應(yīng)用在說(shuō)明書(shū)摘要公布了：本發(fā)明涉及到植物單細(xì)胞的制備，具體涉及植物單細(xì)胞懸液、制備方法及其應(yīng)用，制備方法包括以下步驟：（1）選取生長(zhǎng)狀況良好的植物幼苗，將選取的幼苗放入預(yù)質(zhì)壁處理液中，處理后，取中間葉鞘部分；（2）對(duì)處理好的葉鞘部分原生質(zhì)體酶解液進(jìn)行酶解處理；（3）對(duì)酶解后的原生質(zhì)體進(jìn)行純化處理，得到植物單細(xì)胞懸液。本發(fā)明可高效、大量的制備植物原生質(zhì)體，制備得到的原生質(zhì)體存活率高，可供進(jìn)行后續(xù)研究。例如植物生物育種、蛋白亞細(xì)胞定位、蛋白純化等方面。

本發(fā)明授權(quán)植物單細(xì)胞懸液、制備方法及其應(yīng)用在權(quán)利要求書(shū)中公布了：1.植物單細(xì)胞懸液的制備方法，其特征在于：具體制備步驟如下：S1.剪取生長(zhǎng)情況良好、長(zhǎng)度為1-6cm的植物幼苗，將植物幼苗靜置在預(yù)質(zhì)壁處理液中，黑暗條件下靜置5~20min；S2.預(yù)質(zhì)壁處理完成后，進(jìn)行過(guò)濾，收集沉淀得到預(yù)酶解材料，將得到預(yù)酶解材料加入到酶解液中，進(jìn)行酶解，避光，酶解時(shí)間為2~5h；S3.將酶解完的溶液與W5洗液進(jìn)行混合后進(jìn)行1-2次離心取沉淀，將沉淀與W5洗液混合得到純化的單細(xì)胞懸液；步驟S1中所述的預(yù)質(zhì)壁處理液為0.25~0.5M的甘露醇、0.4%~1.2%脯氨酸-海藻酸鈉-玉米醇溶蛋白納米顆粒的分散液，其中兩者的體積比為2.5：1；其中所述的脯氨酸-海藻酸鈉-玉米醇溶蛋白納米顆粒的制備方法為：將50mg脯氨酸和1.0g玉米醇溶蛋白溶解在100ml質(zhì)量分?jǐn)?shù)為70%的乙醇溶液中得到脯氨酸-玉米醇溶蛋白乙醇溶液，稱取100mg海藻酸鈉溶解在300ml蒸餾水中，將配置好的脯氨酸-玉米醇溶蛋白乙醇溶液以0.1mlmin的速率滴加在海藻酸鈉溶液中，邊滴加邊攪拌，待滴加完成后利用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀將乙醇蒸干，經(jīng)過(guò)冷凍干燥，得到脯氨酸-海藻酸鈉-玉米醇溶蛋白納米粉末；將得到的脯氨酸-海藻酸鈉-玉米醇溶蛋白納米粉末超聲分散在水中，制備得到0.4%~1.2%脯氨酸-海藻酸鈉-玉米醇溶蛋白分散液；所述W5洗液的配方為：CaCl2·2H2O125.0mmolL、NaCl154.0mmolL、KCl5.0mmolL、葡萄糖5.0mmolL、MES5.0mmolL，pH5.8。

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