恭喜華南農業大學;深圳市通量檢測科技有限公司羅林獲國家專利權
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龍圖騰網恭喜華南農業大學;深圳市通量檢測科技有限公司申請的專利一種苯佐卡因的比率熒光免疫檢測方法獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN115753707B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-05-06發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202211392898.2,技術領域涉及:G01N21/64;該發明授權一種苯佐卡因的比率熒光免疫檢測方法是由羅林;林詩淇;賈寶珠;徐振林;周凱;孫遠明;王幸幸;周全軍設計研發完成,并于2022-11-08向國家知識產權局提交的專利申請。
本一種苯佐卡因的比率熒光免疫檢測方法在說明書摘要公布了:本發明公開了一種苯佐卡因的比率熒光免疫檢測方法,其包括以下步驟:S1.藍色熒光碳點的合成;S2.微孔板的包被;S3.標準曲線的建立;S4.樣品中苯佐卡因濃度的測定。本發明基于兩個熒光材料發射峰熒光強度的比值變化進行免疫分析,由于兩個熒光材料受到的外界的干擾是一樣的,兩者的熒光強度比值一定程度上抵消了溫度、極性、熒光團濃度等外界因素的干擾,具有自帶內標效應,因此具有更高精密度、信噪比及靈敏度。該方法對苯佐卡因檢出限下達1fgmL,顯著低于現有檢測方法,可用于苯佐卡因快速檢測,應用前景廣闊。
本發明授權一種苯佐卡因的比率熒光免疫檢測方法在權利要求書中公布了:1.一種苯佐卡因的比率熒光免疫檢測方法,其特征在于,其包括以下步驟:S1.藍色熒光碳點的合成:將檸檬酸二銨和尿素加入到燒杯中并加入超純水溶解,溶解后轉移至高壓反應釜中加熱反應;反應完成后待冷卻至室溫取出,過濾后將濾液用超純水透析,得到藍色熒光碳點水溶液;S2.微孔板的包被:將苯佐卡因包被原加入微孔板中,在冰箱靜置一段時間,隨后洗去包被液;將微孔板拍干,加入封閉液,溫育一段時間后,將微孔板拍干,烘干,備用;S3.標準曲線的建立:將不同濃度的苯佐卡因標準溶液與抗體同時加入步驟S2得到的微孔板中,溫育一定時間后,洗板,加入堿性磷酸酶標記的羊抗鼠二抗,溫育一段時間后洗板,加入L-抗壞血酸-2-磷酸三鈉鹽溶液溫育,隨后加入步驟S1制備的藍色熒光碳點水溶液和多巴胺溶液,溫育;在350nm激發下,記錄380~600nm范圍內的熒光發射光譜,隨后在430nm激發下,記錄460~700nm范圍內的熒光發射光譜,計算熒光強度比值F460F510,以苯佐卡因濃度為橫坐標,F460F510為縱坐標繪制標準曲線;S4.樣品中苯佐卡因濃度的測定:將等體積處理好的樣品替代苯佐卡因標準品溶液,按照步驟S3的步驟操作,將測到的F460F510代入所述步驟S3得到的標準曲線,以得到樣品中苯佐卡因濃度;所述步驟S3中抗體的濃度為1~5μgL-1,時間為30~40min;所述步驟S3中L-抗壞血酸-2-磷酸三鈉鹽濃度為0.1~1mM,時間為30~40min;所述步驟S3中多巴胺濃度為5~10mM;所述步驟S3中,加入步驟S1制備的藍色熒光碳點水溶液和多巴胺溶液,溫育30~40min。
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