恭喜中國科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所張麗華獲國家專利權(quán)
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龍圖騰網(wǎng)恭喜中國科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所申請的專利一種SARS-CoV-2 S1蛋白的檢測方法獲國家發(fā)明授權(quán)專利權(quán),本發(fā)明授權(quán)專利權(quán)由國家知識產(chǎn)權(quán)局授予,授權(quán)公告號為:CN116148365B 。
龍圖騰網(wǎng)通過國家知識產(chǎn)權(quán)局官網(wǎng)在2025-04-29發(fā)布的發(fā)明授權(quán)授權(quán)公告中獲悉:該發(fā)明授權(quán)的專利申請?zhí)?專利號為:202111395695.4,技術(shù)領(lǐng)域涉及:G01N30/02;該發(fā)明授權(quán)一種SARS-CoV-2 S1蛋白的檢測方法是由張麗華;周雯;隨志剛;劉健慧;賀映云;袁輝明;趙寶鋒;楊開廣;張玉奎設(shè)計研發(fā)完成,并于2021-11-23向國家知識產(chǎn)權(quán)局提交的專利申請。
本一種SARS-CoV-2 S1蛋白的檢測方法在說明書摘要公布了:本發(fā)明涉及一種SARS?CoV?2S1蛋白的檢測方法。在該方法中,將SARS?CoV?2S1蛋白用溶液酶解的預(yù)處理方式獲得S1肽段,利用C18色譜柱實現(xiàn)樣品分離,再用orbitrap高分辨質(zhì)譜進行數(shù)據(jù)采集。先在質(zhì)譜的數(shù)據(jù)依賴性模式DDA下進行S1肽段樣品的數(shù)據(jù)采集,挑選出6?10條高強度、肽段匹配譜圖數(shù)PSM較多的特異性肽段,構(gòu)建出平行反應(yīng)監(jiān)測模式PRM的肽段庫;最后根據(jù)構(gòu)建的PRM肽段庫進行SARS?CoV?2S1蛋白的鑒定。該技術(shù)能夠?qū)崿F(xiàn)SARS?CoV?2S1蛋白的高靈敏度、高精確度檢測,有望成為核酸檢測在人體微量病毒檢測和貨物表面微量病毒檢測中的重要補充方法,在遏制SARSCOV?2的傳播中發(fā)揮重要作用。
本發(fā)明授權(quán)一種SARS-CoV-2 S1蛋白的檢測方法在權(quán)利要求書中公布了:1.一種SARS-CoV-2S1蛋白的檢測方法,其特征在于:包括以下步驟:(1)利用離心破裂SARS-CoV-2病毒顆粒,再用甲酸和乙腈進行蛋白質(zhì)提取,最后通過尺寸排阻色譜進行S1蛋白的純化;(2)利用溶液酶解的方法,進行蛋白質(zhì)樣品預(yù)處理;(3)利用C18色譜柱實現(xiàn)樣品分離,再用orbitrap高分辨質(zhì)譜進行數(shù)據(jù)采集;(4)利用DDA模式挑選出特異性肽段,構(gòu)建出PRM模式的肽段庫;(5)利用構(gòu)建的PRM模式的肽段庫進行待分析肽段樣品的SARS-CoV-2S1蛋白的鑒定;步驟(4)過程為:從Uniprot里下載SARS-CoV-2蛋白的全部序列,選取其中從13–685位的氨基酸序列,即為S1蛋白序列;通過軟件pFind自動添加入污染物庫,即為構(gòu)建的蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫;將SARS-CoV-2S1肽段樣品上樣至液質(zhì)聯(lián)用,經(jīng)過梯度分離后,采用DDA模式進行數(shù)據(jù)采集,F(xiàn)ullMS掃描在Orbitrap上實現(xiàn);在采集周期內(nèi),按強度從高至低將2-7價母離子進行二級譜碎裂,獲得質(zhì)譜的原始數(shù)據(jù)文件;以構(gòu)建的蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫為數(shù)據(jù)檢索庫,將質(zhì)譜采集的原始文件采用軟件ProteomeDiscoverer和Maxquant進行數(shù)據(jù)檢索;根據(jù)鑒定到的肽段,選取強度和PSM數(shù)都在前12名的6-10條高強度、PSM數(shù)較多的SARS-CoV-2S1蛋白的特異性肽段,構(gòu)建出PRM模式的肽段庫;步驟(5)所述的PRM模式的肽段庫包括:DIADTTDAVR,SWmESEFR,GWIFGTTLDSK,F(xiàn)ASVYAWNR,HTPINLVR,VGGNYNYLYR,NIDGYFK,QIAPGQTGK。
如需購買、轉(zhuǎn)讓、實施、許可或投資類似專利技術(shù),可聯(lián)系本專利的申請人或?qū)@麢?quán)人中國科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所,其通訊地址為:116023 遼寧省大連市沙河口區(qū)中山路457-41號;或者聯(lián)系龍圖騰網(wǎng)官方客服,聯(lián)系龍圖騰網(wǎng)可撥打電話0551-65771310或微信搜索“龍圖騰網(wǎng)”。
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