恭喜東阿辰康藥業有限公司蔡勝強獲國家專利權
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龍圖騰網恭喜東阿辰康藥業有限公司申請的專利一種牛骨膠原蛋白的提取方法及應用獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN119219764B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-04-18發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202411729752.1,技術領域涉及:C07K14/78;該發明授權一種牛骨膠原蛋白的提取方法及應用是由蔡勝強;周寧;蔡勝峰設計研發完成,并于2024-11-29向國家知識產權局提交的專利申請。
本一種牛骨膠原蛋白的提取方法及應用在說明書摘要公布了:本發明公開了一種牛骨膠原蛋白的提取方法及其應用,屬于膠原蛋白提取技術領域。該提取方法包括預處理、脫脂、脫鈣、酸處理、酶解、粗品制備、純化共7個步驟,各步驟選用最佳試驗條件和試劑,將牛骨采用特定方法進行脫脂脫鈣預處理,有效去除脂肪和無機礦物質鈣鹽,同時還可以最大限度保護膠原蛋白成分活性,提高膠原蛋白的提取率及產品品質;此外還采用酶解和酸處理相結合的方式,調控最佳反應條件,最大限度的獲得高活性的膠原蛋白,制備的高純度高品質的牛骨膠原蛋白,可以進一步應用于保健食品及化妝品領域。
本發明授權一種牛骨膠原蛋白的提取方法及應用在權利要求書中公布了:1.一種牛骨膠原蛋白的提取方法,其特征在于,它包括以下步驟:A.預處理:取新鮮牛骨,清洗干凈后干燥并粉碎成粉,過100目篩得牛骨粉,將牛骨粉轉入高壓反應釜中0.1MPa,110℃,反應5-10min,取出自然冷卻至室溫得預處理牛骨粉;B.脫脂:取預處理牛骨粉加入脫脂溶劑中,室溫下超聲攪拌處理30-45min,離心分離取固體產物干燥得到脫脂后牛骨粉;C.脫鈣:將脫脂后的牛骨粉中加入20倍量去離子水,混合均勻,然后加入脫鈣處理劑于40-45℃下攪拌處理10-12h,過濾,取固體產物,備用;D.酸處理:將步驟C所得固體產物按照料液比與1molL的草酸溶液混合,再加入適量黑曲霉發酵液,混合均勻后于25-30℃、100-200轉min的條件下搖床發酵培養6-8h,得到混合發酵液;E.酶解:調節混合發酵液pH至2.5-3.5,向混合液中加入1wt%的胃蛋白酶,于30-40℃下酶解8-10h,滅酶后得到酶解液;F.粗品制備:向酶解液加入3wt%改性復合生物炭,常溫自然光下攪拌6-10h,然后濾網過濾,取濾液高速離心分離,取上清液再加入NaCl進行鹽析,鹽析后離心,取沉淀物即為粗膠原蛋白;G.純化:將粗膠原蛋白溶于0.5molL的醋酸溶液中,然后在0.1molL磷酸氫二鈉溶液中透析24h,再轉入蒸餾水中透析12h,透析結束后產物凍干即得牛骨膠原蛋白終產品;所述脫脂溶劑為0.4molL的鹽酸溶液與月桂酰胺丙基羥磺基甜菜堿按照10:0.5-2質量比組成;脫脂溶劑與預處理牛骨粉的質量比為2:1;所述脫鈣處理劑為5wt%改性殼聚糖溶液、0.2molL的EDTA、異構癸醇聚氧乙烯醚硫酸鈉按照10:5:0.2-0.5的質量比組成;所述脫鈣處理劑與脫脂后的牛骨粉的質量比為1:1;所述步驟C所得固體產物與草酸溶液的料液比為1g:10ml;所述改性復合生物炭是采用下述方法制備得到:(1)將秸稈清洗干凈后烘干至恒重,粉碎后得到秸稈粉末,然后將秸稈粉末按照1g:30ml的料液比加入到2wt%的K2CO3溶液中,室溫攪拌30-40min后烘干,轉入管式爐在氮氣保護下升溫至800℃,保溫3h,用5wt%鹽酸溶液和去離子水洗滌至中性,烘干得到產物A;(2)取5mL冰醋酸、30mL無水乙醇混合后再加入5mL鈦酸四丁酯,攪拌30min得到溶液A;(3)將15mL無水乙醇與5mL水混合,調節pH至2-3,得到溶液B;在劇烈磁力攪拌下,將溶液B以2秒滴的速度緩慢滴加到溶液A中,得到均勻透明的溶膠;(4)取0.5g步驟(1)所得產物A浸漬于20mL步驟(3)所得溶膠中,于120℃水熱反應6h后,100℃烘干,研磨成粉即得改性復合生物炭;所述改性殼聚糖是采用下述方法制得:取0.5g殼聚糖溶解于裝有50ml1%乙酸溶液中,于45℃下攪拌30min,然后再加入0.5ml雙氧水,在50-55℃恒溫水浴振蕩器中反應5h,得到殼聚糖乙酸溶液,然后再向殼聚糖乙酸溶液中緩慢滴加10ml0.5molL的三聚磷酸鈉溶液,40-45℃反應30min,然后用去離子水洗滌至中性,經冷凍干燥機冷凍干燥后得到改性殼聚糖。
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