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龍圖騰網恭喜三代康年(上海)醫療科技有限公司申請的專利一種包載microRNA的外泌體的制備方法及其產品和應用獲國家發明授權專利權，本發明授權專利權由國家知識產權局授予，授權公告號為：CN114085817B 。

龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-04-15發布的發明授權授權公告中獲悉：該發明授權的專利申請號/專利號為：202111419096.1，技術領域涉及：C12N5/10；該發明授權一種包載microRNA的外泌體的制備方法及其產品和應用是由李海源;盧俊鋒設計研發完成，并于2021-11-26向國家知識產權局提交的專利申請。

本一種包載microRNA的外泌體的制備方法及其產品和應用在說明書摘要公布了：本發明提供了一種包載microRNA的外泌體的制備方法及其產品和應用，所述包載microRNA的外泌體由間充質干細胞直接分泌得到，每15mL脂肪組織獲得的外泌體以蛋白含量計算其產量，經microRNA包載的外泌體總蛋白可達95.13μgSD＝8.43μg，總RNA含量可達201.25μgSD＝31.00μg，未經microRNA包載的外泌體總蛋白含量僅為74.83μgSD＝6.31μg，總RNA含量僅為51.67μgSD＝10.67μg。該方法制備的外泌體含量更多且總RNA含量亦較高。本發明提供的制備方法在藥物生產中能減少步驟、增加產量和降低成本。

本發明授權一種包載microRNA的外泌體的制備方法及其產品和應用在權利要求書中公布了：1.一種外泌體組合物的制備方法，其特征在于，所述制備方法包括如下步驟：（1）分離并培養間充質干細胞，將間充質干細胞與電轉工作液混合，得到混合液，將microRNA母液與混合液混合，得到預轉染溶液；所述microRNA母液包括hsa-mir-218-1、hsa-mir-365a、hsa-mir-29a和hsa-mir-324-5p；所述microRNA母液中hsa-mir-218-1、hsa-mir-365a、hsa-mir-29a和hsa-mir-324-5p的比例為4~5:1~3:2~3:1；所述microRNA母液總RNA濃度為3.2~4.8μgμL；所述microRNA母液與混合液混合的體積比為3:400~600；（2）將步驟（1）中所述預轉染溶液進行電轉處理；（3）將（2）獲得的電轉處理的間充質干細胞加入到未經電轉處理的間充質干細胞的細胞懸液中混合培養，得到培養液；（4）從所述培養液中收集外泌體組合物；具體包括：將培養液依次進行一次離心、二次離心和三次離心，得到包載microRNA的外泌體；所述一次離心的溫度為0~8℃，一次離心的轉速為1800~2200rpm，一次離心的時間為15~30min；所述二次離心的溫度為0~8℃，二次離心的轉速為2500~3500rpm，二次離心的時間為30~40min；所述三次離心的溫度為0~8℃，三次離心的轉速為11000~15000rpm，三次離心的時間為50~60min。

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