恭喜周口師范學院林云龍獲國家專利權
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龍圖騰網恭喜周口師范學院申請的專利一種萊氏綠僵菌附著胞的簡易誘導方法獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN115537371B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-05-13發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202211467517.2,技術領域涉及:C12N3/00;該發明授權一種萊氏綠僵菌附著胞的簡易誘導方法是由林云龍;范利琴;李鑫鑫;董星雨;盛文婷;孫佳;王佳慧;馬怡婷;趙琳琳設計研發完成,并于2022-11-22向國家知識產權局提交的專利申請。
本一種萊氏綠僵菌附著胞的簡易誘導方法在說明書摘要公布了:本發明公開了一種萊氏綠僵菌附著胞的簡易誘導方法,包括如下步驟:S1:稱取瓊脂粉并加入150mL純水,混合均勻后于121℃下滅菌;S2:將定性濾紙進行高溫滅菌,并于超凈臺中平均分剪為4等分,將濾紙片平鋪于S1步驟中的平板培養皿中;S3:將方形蓋玻片高溫滅菌,并小心將蓋玻片置于S2步驟中濾紙的表面;S4:以初代萊氏綠僵菌菌株轉接培養7~10天至大量產孢,并以0.05%吐溫80作為溶劑,配置1x106mL濃度分生孢子懸浮液待用;S5:吸取S4步驟中分生孢子懸浮液50μL,滴加于S3步驟中的蓋玻片上表面,并涂抹分布整個玻片,獲得制備好的培養皿;S6:將S5步驟中培養皿小心封口,培養后在顯微鏡下觀察附著胞的形成狀況。本發明為創制高毒力萊氏綠僵菌菌株提供理論技術手段。
本發明授權一種萊氏綠僵菌附著胞的簡易誘導方法在權利要求書中公布了:1.一種萊氏綠僵菌附著胞的簡易誘導方法,其特征在于,包括如下步驟:S1:水瓊脂的制備:稱取瓊脂粉1.8g放入250mL容量瓶中,并加入150mL純水,混合均勻后于121℃下滅菌,獲得水瓊脂,待滅菌完成后倒入平板培養皿后冷卻待用;S2:定性濾紙的準備:將定性濾紙進行高溫滅菌,并于超凈臺中平均分剪為4等分,將濾紙片平鋪于S1步驟中的平板培養皿中;S3:蓋玻片的處理:將方形蓋玻片高溫滅菌,并小心將蓋玻片置于S2步驟中濾紙的表面;S4:孢子懸浮液的制備:以初代萊氏綠僵菌菌株轉接培養7~10天至大量產孢,并以0.05%吐溫80作為溶劑,配置1x106個mL濃度分生孢子懸浮液待用;S5:滴加涂覆:吸取S4步驟中分生孢子懸浮液50μL,滴加于S3步驟中平板培養皿內的蓋玻片上表面,并涂抹分布整個玻片,獲得附著胞的誘導體系;S6:培養:將S5步驟中誘導體系的培養皿小心封口,并置于25℃光照培養箱中進行培養5天后,在顯微鏡下觀察附著胞的形成狀況,分析誘導結果;所述S1和S2步驟中,所述平板培養皿和定性濾紙的規格大小均為90mm;所述S1步驟中,所述滅菌時間為15min,所用水瓊脂濃度為1.0~1.2%;所述S3步驟中,所述方形蓋玻片的規格大小為2cmx2cm。
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