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龍圖騰網恭喜谷雨生物科技集團股份有限公司;廣州青囊生物科技有限公司申請的專利一種高效轉化高純度稀有人參皂苷CK的復合酶及其制備方法與應用獲國家發明授權專利權，本發明授權專利權由國家知識產權局授予，授權公告號為：CN119120431B 。

龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-05-09發布的發明授權授權公告中獲悉：該發明授權的專利申請號/專利號為：202411221196.7，技術領域涉及：C12N9/42；該發明授權一種高效轉化高純度稀有人參皂苷CK的復合酶及其制備方法與應用是由吳學明;侯森;童夢西;李安章設計研發完成，并于2024-09-02向國家知識產權局提交的專利申請。

本一種高效轉化高純度稀有人參皂苷CK的復合酶及其制備方法與應用在說明書摘要公布了：本發明涉及一種高效轉化高純度稀有人參皂苷CK的復合酶及其制備方法與應用，屬于微生物技術領域。本發明的復合酶包括β?葡萄糖苷酶、果糖基轉移酶、乳糖酶、纖維素酶和β?葡聚糖酶。本發明通過選取β?葡萄糖苷酶、果糖基轉移酶、乳糖酶、纖維素酶和β?葡聚糖酶搭配得到復合酶，能夠在酶工程工藝中制備人參皂苷CK，具有協同增效將人參皂苷Rb1轉化為人參皂苷CK的轉化率提高的作用。

本發明授權一種高效轉化高純度稀有人參皂苷CK的復合酶及其制備方法與應用在權利要求書中公布了：1.一種高效轉化高純度稀有人參皂苷CK的復合酶，其特征在于，包括β-葡萄糖苷酶、果糖基轉移酶、乳糖酶、纖維素酶和β-葡聚糖酶，所述β-葡萄糖苷酶、果糖基轉移酶、乳糖酶、纖維素酶和β-葡聚糖酶的重量比為β-葡萄糖苷酶：果糖基轉移酶：乳糖酶：纖維素酶：β-葡聚糖酶＝0.05-0.2：0.005-0.2：0.01-0.1：0.01-0.1：0.02-0.1；所述β-葡萄糖苷酶的制備方法包括以下步驟：A1、對來源于土壤中華單胞菌的β-葡萄糖苷酶進行密碼子優化，通過基因編輯技術制備得到帶有β-葡萄糖苷酶編碼序列的表達載體，所述密碼子優化后的β-葡萄糖苷酶的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示；A2、將步驟A1所述表達載體轉化至大腸桿菌中，通過篩選及鑒定得到陽性克隆；A3、將步驟A2所得陽性克隆制備為二級種子液，利用二級種子液進行分批補料發酵，得到發酵液；A4、對步驟A3所得發酵液進行離心，收集菌體沉淀，對所得菌體沉淀進行破碎、離心、濃縮和凍干處理，得到β-葡萄糖苷酶；在步驟A3中，所述分批補料發酵包括以下操作：B1、將二級種子液接種至發酵培養基中，調節pH＝6.6-7.0，溫度設置為35-37℃；所述二級種子液與發酵培養基的體積比為二級種子液：發酵培養基＝0.8-1:30；B2、當溶氧下降至60-70％時，調溫至23-27℃并開始補料，第一小時補料速度190-200mLh，第二小時補料速度220-230mLh，第三小時補料速度250-260mLh并維持不變；通過控制罐壓，轉速和通空氣量以控制溶氧慢慢下降至12-18％；補料后每4h取樣檢測發酵液的OD600值，當OD600值不再上升時結束發酵。

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