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龍圖騰網(wǎng)獲悉安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物研究所申請(qǐng)的專利花生苗期冠腐病抗性鑒定方法獲國家發(fā)明授權(quán)專利權(quán)，本發(fā)明授權(quán)專利權(quán)由國家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局授予，授權(quán)公告號(hào)為：CN116355985B 。

龍圖騰網(wǎng)通過國家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局官網(wǎng)在2025-04-01發(fā)布的發(fā)明授權(quán)授權(quán)公告中獲悉：該發(fā)明授權(quán)的專利申請(qǐng)?zhí)?專利號(hào)為：202310282955.X，技術(shù)領(lǐng)域涉及：C12Q1/18；該發(fā)明授權(quán)花生苗期冠腐病抗性鑒定方法是由朱曉峰;倪皖莉;姜濤;王嵩;儲(chǔ)文設(shè)計(jì)研發(fā)完成，并于2023-03-20向國家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局提交的專利申請(qǐng)。

本花生苗期冠腐病抗性鑒定方法在說明書摘要公布了：本發(fā)明公開了花生苗期冠腐病抗性鑒定方法，包括：1將黑曲霉病原菌AN1通過PDA平板和麥粒培養(yǎng)基的培養(yǎng)，制備接種體；2將室內(nèi)催芽后露白的種子于黑曲霉孢子懸浮液中過夜培養(yǎng)；3將侵染后的露白種子，插入無菌土中培養(yǎng)；待子葉剛張開，露出第一片真葉時(shí)，將麥粒接種體均勻地埋在花生莖基胚芽和子葉間隙四周；4接種后培養(yǎng)1周左右，根據(jù)發(fā)病程度分級(jí)、計(jì)算病情指數(shù)，并進(jìn)行抗性評(píng)價(jià)。本發(fā)明提供一種操作簡單、準(zhǔn)確、高效、穩(wěn)定的花生苗期冠腐病抗性鑒定方法，可為今后抗病性花生種質(zhì)資源的篩選及抗病育種研究提供重要的技術(shù)支撐，從而為有效防控花生苗期冠腐病奠定重要的研究基礎(chǔ)。

本發(fā)明授權(quán)花生苗期冠腐病抗性鑒定方法在權(quán)利要求書中公布了：1.花生苗期冠腐病抗性鑒定方法，其特征在于，包括以下步驟：（1）花生冠腐病接種體的制備：將分離純化的黑曲霉（Aspergillusniger），轉(zhuǎn)接到PDA平板上，28~30℃黑暗培養(yǎng)2~3d，再轉(zhuǎn)接到麥粒培養(yǎng)基上，于28~30℃黑暗條件下靜置培養(yǎng)4~5d，所得帶菌麥粒即為花生冠腐病接種體；（2）種子催芽：將待測花生品種的種子在30~40℃的溫水中浸泡6~7h，撈出后用濕潤的紗布包裹放入27~30℃的培養(yǎng)箱中黑暗培養(yǎng)1~2d，期間噴水，保持紗布濕潤，催芽至種子露白；（3）種子侵染：將催芽后的露白種子放入6.0×107~12.0×107個(gè)ml黑曲霉孢子懸浮液中，過夜培養(yǎng)；其中，所述黑曲霉孢子懸浮液的制備方法包括：將分離純化的黑曲霉轉(zhuǎn)接到PDA上，28~30℃黑暗培養(yǎng)，待菌絲長滿整個(gè)平板，用移液槍吸取無菌水反復(fù)沖洗吹打菌落，然后用三層無菌紗布過濾，顯微鏡下用血球計(jì)數(shù)器統(tǒng)計(jì)孢子數(shù)量，用無菌水調(diào)整孢子懸浮液濃度為6.0×107~12.0×107個(gè)ml；（4）病原菌接種：將侵染后的露白種子播種于無菌土中黑暗培養(yǎng)，待子葉剛張開，露出第一片真葉時(shí)，將步驟（1）的接種體均勻地埋在花生莖基胚芽和子葉間隙四周，每株接種20粒帶菌麥粒，連續(xù)3d每天澆水，保持土壤濕潤；接種后，培養(yǎng)箱條件控制在：35~38℃、光照13h與28~30℃、黑暗11h交替，濕度保持在95%以上；光照強(qiáng)度為80000~100000lx；（5）培養(yǎng)5~10d后觀察花生苗的發(fā)病情況，按以下標(biāo)準(zhǔn)逐株確定發(fā)病等級(jí)；發(fā)病等級(jí)分0-5級(jí)，具體劃分標(biāo)準(zhǔn)為：0級(jí)：子葉和莖基部無病斑，無發(fā)病癥狀；1級(jí)：僅子葉有輕微病斑；2級(jí)：莖基部有病斑，但病斑不超過莖基部的13；3級(jí)：莖基部有病斑，病斑大小超過莖基部的13，但不超過莖基部的12；4級(jí)：莖基部有病斑，病斑大小超過莖基部的12；5級(jí)：整個(gè)種仁和子葉腐爛或整株幼苗死亡；再根據(jù)各株花生苗的發(fā)病等級(jí)計(jì)算出待測花生品種的病情指數(shù)，病情指數(shù)=[∑各級(jí)病株數(shù)×相應(yīng)病級(jí)數(shù)總株數(shù)×最高病級(jí)數(shù)]×100%（6）根據(jù)病情指數(shù)劃分抗性等級(jí)，鑒定待測花生品種的抗病性；所述抗性等級(jí)的劃分標(biāo)準(zhǔn)為：免疫：病情指數(shù)≤5%；高抗：5%病情指數(shù)≤15%；抗病：15%病情指數(shù)≤25%；中抗：25%病情指數(shù)≤45%；中感：45%病情指數(shù)≤65%；感病：65%病情指數(shù)≤75%；高感（HS）：病情指數(shù)（DI）75%，其中，所述黑曲霉為AspergillusnigerAN1，保藏編號(hào)為CCTCCNO：M2023126。

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