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恭喜安德烈斯·黑蘭-維韋斯;簡·貝內爾-里維羅斯安德烈斯·黑蘭-維韋斯獲國家專利權

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龍圖騰網恭喜安德烈斯·黑蘭-維韋斯;簡·貝內爾-里維羅斯申請的專利使用耳垢測定皮質醇和葡萄糖平均濃度的方法獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN113748341B

龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-06-13發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:201880087936.9,技術領域涉及:G01N33/483;該發明授權使用耳垢測定皮質醇和葡萄糖平均濃度的方法是由安德烈斯·黑蘭-維韋斯;簡·貝內爾-里維羅斯設計研發完成,并于2018-12-20向國家知識產權局提交的專利申請。

使用耳垢測定皮質醇和葡萄糖平均濃度的方法在說明書摘要公布了:一種在耳垢中測量葡萄糖和皮質醇水平的方法,其中,將測得的皮質醇和葡萄糖水平解釋為平均皮質醇和葡萄糖水平;以及一種安全、實用、可靠、衛生的耳垢自提取醫療設備。

本發明授權使用耳垢測定皮質醇和葡萄糖平均濃度的方法在權利要求書中公布了:1.一種測量耳垢中葡萄糖和皮質醇水平的方法,包括以下步驟: 通過任何合適的方法從耳朵中提取耳垢樣本; 按照測量方法準備耳垢樣本以測量皮質醇和葡萄糖水平; 使用任何已知的手段或方法測量皮質醇和葡萄糖,其中將皮質醇和葡萄糖的水平解釋為長期平均皮質醇和葡萄糖水平, 其中: 耳垢的提取通過包括以下部分的提取裝置進行: 具有第一和第二端的手柄,所述第二端具有聯接裝置: 可拆卸的海綿頭尖端,其包括基座和直接從基座上部懸垂、縱向延伸的細長構件,其中,基座的下部有聯接手柄的部分,并且其中,細長構件具有星形橫截面; 細長的海綿,其有位于中央的縱向殼體,用于容納基座的細長部件; 其中,通過將帶有海綿的尖端插入耳朵并在耳道內旋轉海綿來獲得耳垢, 其中: 樣本的制備通過以下方式進行: a干燥耳垢樣本,直到所有水分從樣本中蒸發為止,該步驟使用凍干來完成; b稱量干燥耳垢樣本的重量,以通過干重來標準化皮質醇的量,歸一化是指將測得的重量調整到標準比例,以便能夠比較數據; c用1ml磷酸鹽緩沖鹽溶液PBS使干燥后的樣本均質化,獲得耳垢的PBS溶液,磷酸鹽緩沖鹽水PBS溶液的體積是耳垢10重量的10倍,此外,能夠使用任何親水性溶劑; d將步驟c中獲得的溶液分為第一溶液部分和第二溶液部分,并將每個溶液部分分別添加到試管中; e在PBS和第一溶液部分之間以1∶1的比例向第一溶液部分中添加溶劑,以獲得耳垢在PBS與溶劑中的混合溶液; f在至少一分鐘內攪拌裝有步驟e獲得的溶液的試管,以使其充分混合,并在重懸后加入0.5mg的二乙醚,與PBS的比例為1:1; g在至少兩個小時內,將步驟g中獲得的混合溶液在-18至-21℃的溫度下冷卻,以確保液體部分被冷凍并且不污染有機部分,該步驟提取那些明確溶解在二乙醚中的化合物,采取該步驟是因為盡管二乙醚部分在-20℃下保持液態,但磷酸鹽部分卻被凍結了; h從冷卻的溶液中提取明確溶于二乙醚的化合物; i干燥剩余的液體溶液; j將步驟i中得到的干燥部分儲存在-80℃下以備進一步使用; k向第二溶液部分中加入300pg皮質醇,以得到耳垢與皮質醇混合后在PBS中的溶液; I向步驟k獲得的溶液中加入0.5ml溶劑,以定量純化的皮質醇的量; m在至少一分鐘內攪拌裝有步驟I所得溶液的試管,獲得的溶液在重懸后向其加入0.5mg乙醚,與PBS的比例為1:1; n在至少兩個小時內,將步驟m獲得的混合溶液在-18至-21℃的溫度下冷卻,確保液體部分被冷凍,并且不會污染有機部分; o從冷卻的溶液中萃取明確溶于二乙醚的化合物; p干燥剩余的液體溶液; q將步驟i中獲得的干燥部分儲存在-20至-90℃之間的溫度下以供進一步使用; r將0.5ml300pgml的純化皮質醇溶液在pH介于6.8和7.2之間的PBS中溶解,進行此步驟為了提升皮質醇耳垢提取方案的效率, s對第二溶液部分進行與第一溶液部分相同的程序以從中提取皮質醇, 皮質醇的測量通過以下方法進行: a使用制造商提供的緩沖液分析法對提取的樣本進行重構,該方法使用比色競爭ELISA技術,通過向提取的樣本中添加緩沖液以獲得溶液,通過將其靜置并攪拌來對皮質醇進行定量; b使用測量皮質醇的標準曲線-酶標儀NovoStar來測量樣本中皮質醇的總量; c使用熒光技術將耳垢的干重歸一化,其中熒光計在530-570nm范圍內激發,在590-600nm發射范圍內讀數,由于年齡,性別,不同的醫療狀況和壓力水平等多個變量會影響耳垢中皮質醇的水平,而膽固醇水平不受上述變量的影響,因此使用膽固醇水平以避免這些協變量使皮質醇的結果混淆,并且遵循制造商的說明,使用試劑盒對溶解的耳垢溶液中的葡萄糖含量進行測量,其中葡萄糖吸收量在505nm處一式三份進行定量,使用其吸收平均值獲得葡萄糖濃度mgdl,根據標準化過程后樣本的初始重量,計算溶液中的葡萄糖總量。

如需購買、轉讓、實施、許可或投資類似專利技術,可聯系本專利的申請人或專利權人安德烈斯·黑蘭-維韋斯;簡·貝內爾-里維羅斯,其通訊地址為:英國大倫敦;或者聯系龍圖騰網官方客服,聯系龍圖騰網可撥打電話0551-65771310或微信搜索“龍圖騰網”。

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