恭喜上海市第六人民醫院文根獲國家專利權
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龍圖騰網恭喜上海市第六人民醫院申請的專利一種去細胞真皮水凝膠及其制備方法與應用獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN116637229B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-05-23發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202310367659.X,技術領域涉及:C12N5/0786;該發明授權一種去細胞真皮水凝膠及其制備方法與應用是由文根;余雅玲;肖慧敏;劉衒哲;陳欣;柴益民設計研發完成,并于2023-04-07向國家知識產權局提交的專利申請。
本一種去細胞真皮水凝膠及其制備方法與應用在說明書摘要公布了:本發明涉及生物技術領域,提供一種去細胞真皮水凝膠及其制備方法與應用;本發明的去細胞真皮水凝膠通過調節細胞增殖、遷移和免疫應答對組織再生發揮多重作用,從而促進創面的全層修復,對組織過程和再生醫學的發展具有重要的作用;本發明的去細胞真皮水凝膠通過仿時序性細胞因子釋放調控體內免疫微環境,促進血管內皮細胞和成纖維細胞的生長增殖,促進皮膚附屬器官再生,顯著促進創面愈合,與商品敷料相比,本發明的去細胞真皮水凝膠極大地縮短了創面愈合時間,加速了皮膚結構和功能的重建。
本發明授權一種去細胞真皮水凝膠及其制備方法與應用在權利要求書中公布了:1.一種去細胞真皮水凝膠的制備方法,其特征在于,步驟包括:S1、制備M1表型極化的巨噬細胞條件培養基以及M2表型極化的巨噬細胞條件培養基;S2、取動物來源的真皮層,將真皮層依次進行去細胞處理、第一凍干處理以及粉碎處理,制得真皮去細胞支架;S3、將真皮去細胞支架溶解于含有鹽酸以及胃蛋白酶的PBS溶液中,制得真皮去細胞支架溶液,并依次進行消化處理、酰化處理、透析處理以及第二凍干處理,制得光敏性去細胞真皮凍干粉;S4、將M1表型極化的巨噬細胞條件培養基、光敏性去細胞真皮凍干粉以及光引發劑混合,制得M1型免疫因子的去細胞預凝膠;S5、將M2表型極化的巨噬細胞條件培養基、光敏性去細胞真皮凍干粉以及光引發劑混合,制得M2型免疫因子的去細胞預凝膠;S6、將M2型免疫因子的去細胞預凝膠放入模具內,紫外光照進行光固化處理得到M2型免疫因子的去細胞水凝膠,將M1型免疫因子的去細胞預凝膠包覆于M2型免疫因子的去細胞水凝膠之外,并于紫外照射下進行固化處理,即得去細胞真皮水凝膠;步驟S1包括:S11、分離小鼠的脛骨以及股骨,消毒后,采用DMEM完全培養基將脛骨以及股骨中的骨髓沖洗至離心管中;S12、在離心管中加入紅細胞裂解液,反復吹打后靜置,靜置后進行離心處理并去除上清液;S13、在離心管內加入DMEM細胞培養液懸浮細胞并進行過濾處理后進行離心,去除上清液并重復本步驟一次;S14、在離心管內加入刺激培養基,誘導骨髓細胞分化為巨噬細胞;調整細胞密度至1×106個mL并置于37℃、5%CO2培養箱中培養,待后續處理;刺激培養基為含有10ngmL巨噬細胞集落刺激因子的DMEM完全培養基;S15、更換刺激培養基繼續培養4天后,再次更換刺激培養基;在刺激培養基中加入含有50ngmLIFNγ的100ngmL脂多糖,進行M1極化處理;在刺激培養基中加入10ngmLIL-4和或10ngmLIL-13,進行M2極化處理;S16、分別收集M1極化處理以及M2極化處理后的培養基,離心取上清,即得M1表型極化的巨噬細胞條件培養基以及M2表型極化的巨噬細胞條件培養基。
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