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龍圖騰網(wǎng)恭喜利蘭斯坦福初級大學(xué)董事會(huì);布蘭迪斯大學(xué)申請的專利遺傳工程細(xì)胞的多元性產(chǎn)生和條形碼編制獲國家發(fā)明授權(quán)專利權(quán)，本發(fā)明授權(quán)專利權(quán)由國家知識產(chǎn)權(quán)局授予，授權(quán)公告號為：CN111344403B 。

龍圖騰網(wǎng)通過國家知識產(chǎn)權(quán)局官網(wǎng)在2025-05-06發(fā)布的發(fā)明授權(quán)授權(quán)公告中獲悉：該發(fā)明授權(quán)的專利申請?zhí)?專利號為：201880073960.7，技術(shù)領(lǐng)域涉及：C12N9/22；該發(fā)明授權(quán)遺傳工程細(xì)胞的多元性產(chǎn)生和條形碼編制是由K·R·羅伊;J·D·史密斯;R·P·圣昂格;L·M·施泰因梅茨;J·E·哈伯設(shè)計(jì)研發(fā)完成，并于2018-09-14向國家知識產(chǎn)權(quán)局提交的專利申請。

本遺傳工程細(xì)胞的多元性產(chǎn)生和條形碼編制在說明書摘要公布了：本公開涉及使用RNA引導(dǎo)的核酸酶和基因組條形碼多元性產(chǎn)生遺傳工程細(xì)胞和并進(jìn)行表型分型。具體地，采用通過同源介導(dǎo)修復(fù)促進(jìn)所需靶染色體基因座處精確基因組編輯的系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)高通量多元性基因組編輯。向?qū)NA和供體DNA序列作為基因組條形碼在不同的染色體基因座整合，可允許從轉(zhuǎn)化子池中鑒定、分離和大規(guī)模平行驗(yàn)證單獨(dú)變體。菌株能根據(jù)其精確遺傳修飾進(jìn)行排列，如供體DNA摻入異源或天然基因所指定。本公開還涉及一種典型向?qū)NA識別區(qū)外的密碼子編輯方法，其使蛋白編碼基因的完全飽和突變可行，一種基于標(biāo)記的內(nèi)部克隆方法，其移除由寡核苷酸合成錯(cuò)誤和不完全載體骨架切割導(dǎo)致的背景，以及一種通過活躍的供體募集來提高同源介導(dǎo)修復(fù)的方法。

本發(fā)明授權(quán)遺傳工程細(xì)胞的多元性產(chǎn)生和條形碼編制在權(quán)利要求書中公布了：1.一種將供體多核苷酸定位到靶細(xì)胞中基因組靶基因座的方法，所述方法包括：a用第一重組多核苷酸轉(zhuǎn)染靶細(xì)胞，所述第一重組多核苷酸包含基因組編輯盒，所述基因組編輯盒包含：i與編碼能在待修飾基因組靶基因座雜交的向?qū)NAgRNA的核酸序列可操作連接的啟動(dòng)子，和ii供體多核苷酸，其包含待整合入所述基因組靶基因座的序列；b用第二重組多核苷酸轉(zhuǎn)染所述靶細(xì)胞，所述第二重組多核苷酸編碼第一多肽且編碼第二多肽，其中i所述第一多肽是RNA-引導(dǎo)的核酸酶，其中當(dāng)與所述gRNA復(fù)合時(shí)，所述RNA-引導(dǎo)的核酸酶識別所述基因組靶基因座并在所述基因組靶基因座產(chǎn)生DNA斷裂位點(diǎn)；和ii所述第二多肽是供體募集蛋白，其中所述供體募集蛋白包含：1DNA結(jié)合域，其結(jié)合所述供體多核苷酸，和2DNA斷裂位點(diǎn)定位結(jié)構(gòu)域，其與所述基因組靶基因座處的DNA斷裂附近的區(qū)域結(jié)合；其中當(dāng)與所述DNA斷裂附近的區(qū)域和所述供體多核苷酸都結(jié)合時(shí)，所述供體募集蛋白使所述供體多核苷酸選擇性募集到所述DNA斷裂位點(diǎn)，從而將供體多核苷酸定位到基因組靶基因座，其中所述DNA結(jié)合域包含LexADNA結(jié)合域，并且所述DNA斷裂位點(diǎn)定位結(jié)構(gòu)域包含forkhead相關(guān)的FHA磷酸蘇氨酸結(jié)合域或包含TP53BP1結(jié)構(gòu)域，其中所述方法是非治療方法。

如需購買、轉(zhuǎn)讓、實(shí)施、許可或投資類似專利技術(shù)，可聯(lián)系本專利的申請人或?qū)＠麢?quán)人利蘭斯坦福初級大學(xué)董事會(huì);布蘭迪斯大學(xué)，其通訊地址為：美國加利福尼亞州；或者聯(lián)系龍圖騰網(wǎng)官方客服，聯(lián)系龍圖騰網(wǎng)可撥打電話0551-65771310或微信搜索“龍圖騰網(wǎng)”。