恭喜天津科技大學;中國檢驗檢疫科學研究院郭峻獲國家專利權
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龍圖騰網恭喜天津科技大學;中國檢驗檢疫科學研究院申請的專利一種基于MIRA-CRISPR Cas12a系統的丙二酸鹽克羅諾桿菌檢測方法獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN118460744B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-04-01發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202410429587.1,技術領域涉及:C12Q1/689;該發明授權一種基于MIRA-CRISPR Cas12a系統的丙二酸鹽克羅諾桿菌檢測方法是由郭峻;楊亞玲;趙欣;王靜設計研發完成,并于2024-04-10向國家知識產權局提交的專利申請。
本一種基于MIRA-CRISPR Cas12a系統的丙二酸鹽克羅諾桿菌檢測方法在說明書摘要公布了:本發明公開了一種基于MIRA?CRISPRCas12a系統的丙二酸鹽克羅諾桿菌檢測方法,采用高溫水煮法進行克羅諾桿菌DNA快速提取,篩選出丙二酸鹽克羅諾桿菌特異性序列Genbank:NZ_CP013940.12727946...2728626為檢測靶標,利用MIRA等溫擴增技術實現現場目的基因快速擴增,設計針對特異性序列的CrRNA,以激活Cas12a酶非特異性地切割功能,從而通過ssDNA報告探針實現對檢測結果的判讀。本發明構建的檢測體系具有優異的靈敏度,極高的特異性,且檢測時間短的優勢,檢測方法通用于丙二酸鹽克羅諾桿菌的檢測。
本發明授權一種基于MIRA-CRISPR Cas12a系統的丙二酸鹽克羅諾桿菌檢測方法在權利要求書中公布了:1.一種基于MIRA-CRISPRCas12a系統的丙二酸鹽克羅諾桿菌的非診斷目的的檢測方法,其特征在于:包括,采用高溫水煮法對克羅諾桿菌DNA快速提取;MIRA特異性引物擴增丙二酸鹽克羅諾桿菌特異性基因,得到可用于MIRA-CRISPRCas12a系統的丙二酸鹽克羅諾特異性產物;設計針對丙二酸鹽克羅諾桿菌特異性產物的CrRNA;通過CRISPRCas12a檢測系統,CrRNA靶向識別丙二酸鹽克羅諾特異性產物,激活CrRNA-Cas12a非特異性切割活性,通過兩端標記FAMBHQ1基團的報告探針對檢測結果判讀,實現對丙二酸鹽克羅諾桿菌熒光可視化快速檢測,報告探針為:6-FAM-TTTTTTTT-BHQ-1;其中,所述MIRA特異性引物序列分別為SEQNO.1和SEQNO.2,CrRNA的核苷酸序列為SEQNO.9。
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