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龍圖騰網恭喜海南熱帶海洋學院申請的專利一種斑馬魚腸道類器官體外培養立體模型及其制備方法獲國家發明授權專利權，本發明授權專利權由國家知識產權局授予，授權公告號為：CN119410572B 。

龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-03-25發布的發明授權授權公告中獲悉：該發明授權的專利申請號/專利號為：202510033396.8，技術領域涉及：C12N5/071；該發明授權一種斑馬魚腸道類器官體外培養立體模型及其制備方法是由曾小娜;陳燕;黃海;謝青梅;陳勝;潘延曦;劉茜瑤;謝明馨設計研發完成，并于2025-01-09向國家知識產權局提交的專利申請。

本一種斑馬魚腸道類器官體外培養立體模型及其制備方法在說明書摘要公布了：本發明公開了一種斑馬魚腸道類器官體外培養立體模型及其制備方法，屬于水產養殖類器官技術領域。其制備方法包括以下步驟：將斑馬魚腸道樣本置于含五抗的PBS中分離清洗，得到腸道組織；將腸道組織先于分離液中渦旋振蕩，棄去分離液，然后于螯合液中渦旋振蕩，過濾，得到斑馬魚隱窩細胞懸液；對細胞懸液進行差速離心，沉淀重懸于DMEM培養基中，得到腸道器官隱窩懸液；先將隱窩懸液滴膠接種于斑馬魚腸道類器官培養基和基質膠混合液中進行體外培養，制得。本發明解決了現有缺乏出芽率高、效果好的斑馬魚腸道類器官體外模型制備方法的問題，為基于斑馬魚腸道類器官的腸病分子機制研究、疾病模擬和藥效篩選等提供研究工具，具有良好的應用價值。

本發明授權一種斑馬魚腸道類器官體外培養立體模型及其制備方法在權利要求書中公布了：1.一種斑馬魚腸道類器官體外培養立體模型的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：（1）將斑馬魚腸道樣本置于含五抗的PBS中分離清洗，得到腸道組織；（2）將步驟（1）所得腸道組織先于分離液中渦旋振蕩，棄去分離液，然后于螯合液中渦旋振蕩，過濾，得到斑馬魚隱窩細胞懸液；（3）對步驟（2）所得斑馬魚隱窩細胞懸液進行差速離心，將沉淀重懸于DMEM培養基中，得到腸道器官隱窩懸液；（4）先將步驟（3）所得腸道器官隱窩懸液滴膠接種于斑馬魚腸道類器官培養基和基質膠混合液中進行體外培養，制得；其中，斑馬魚腸道類器官培養基包括以下組分：DMEM高糖培養基、胎牛血清、青霉素鏈霉素雙抗、Wnt-3a、EGF、R-spondin-1、Noggin、p38MAPK抑制劑和N-AcetyI；所述步驟（2）中分離液為氯化鈉、氯化鉀、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鈉和L-Glu的混合水溶液，其中，氯化鈉的濃度為6-10gL，氯化鉀的濃度為0.1-0.3gL，磷酸二氫鉀的濃度為0.1-0.3gL，磷酸氫二鈉的濃度為0.4-0.8gL，L-Glu的濃度為0.2-0.4gL；所述步驟（2）中螯合液為濃度5-15gL的EDTA-2Na溶液；所述步驟（4）中斑馬魚腸道類器官培養基中DMEM高糖培養基占總培養基體積的40-60%，胎牛血清占總培養基體積的5-15%，Wnt-3a占總培養基體積的30-50%，EGF的濃度為0.02-0.06μgmL，R-spondin-1的濃度為0.2-0.6μgmL，Noggin的濃度為0.06-0.1μgmL，p38MAPK抑制劑的濃度為8-12μmolL，N-AcetyI的濃度為0.8-1.2mmolL；斑馬魚腸道類器官培養基和基質膠按體積比為1：1混合均勻，得到混合液，滴膠接種時每1μL混合液中加入3個腸道器官隱窩，滴膠的體積為50μL滴，接種密度為7滴孔。

如需購買、轉讓、實施、許可或投資類似專利技術，可聯系本專利的申請人或專利權人海南熱帶海洋學院，其通訊地址為：572022 海南省三亞市育才路1號；或者聯系龍圖騰網官方客服，聯系龍圖騰網可撥打電話0551-65771310或微信搜索“龍圖騰網”。