恭喜江蘇省農業科學院劉賢金獲國家專利權
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龍圖騰網恭喜江蘇省農業科學院申請的專利一種基于受體-抗體夾心的Cry毒素檢測方法獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN115128281B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-03-21發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202210751409.1,技術領域涉及:G01N33/68;該發明授權一種基于受體-抗體夾心的Cry毒素檢測方法是由劉賢金;沈成;劉媛;胡曉丹;高美靜;林曼曼;張霄;徐重新設計研發完成,并于2022-06-28向國家知識產權局提交的專利申請。
本一種基于受體-抗體夾心的Cry毒素檢測方法在說明書摘要公布了:本發明涉及一種基于受體?抗體夾心的Cry毒素檢測方法,包括:1將棉鈴蟲鈣黏蛋白毒素結合區片段稀釋后包被過夜2次日加入封閉液反應;3加入待測樣品反應;4加入Cry2Aa、Cry1Ab兔多克隆抗體反應;5加入HRP標記的羊抗兔抗體反應;6加入顯色液反應;7加入終止液,測定OD450值,帶入標準線性方程即可獲得Cry毒素的殘留量;上述方法利用HaCad?TBR作為捕獲抗體,可同時檢測Cry1Ab、Cry1Ac、Cry2Aa、Cry2Ab四種毒素,且靈敏度高,可用于農產品新鮮葉片和谷物中殘留的Cry毒素蛋白殘留量檢測和類型分析研究。
本發明授權一種基于受體-抗體夾心的Cry毒素檢測方法在權利要求書中公布了:1.一種基于受體-抗體夾心的Cry毒素檢測方法,其特征在于,所述Cry毒素為Cry1Ab、Cry1Ac、Cry2Aa和Cry2Ab四種Bt毒素,其具體檢測方法如下:1)使用包被液將棉鈴蟲鈣黏蛋白毒素結合區片段稀釋為0.3-10μgmL,4℃包被過夜;所述棉鈴蟲鈣黏蛋白毒素結合區片段核苷酸序列如SEQIDNO.1所示;2)次日,PBST洗板,每孔加入封閉液250μL,37℃反應1h;3)PBST洗板,每孔加入待測樣品100μL,37℃反應1h;4)PBST洗板,向酶標板中分別加入Cry2Aa兔多克隆抗體和Cry1Ab兔多克隆抗體,加入量均為100μL孔,37℃反應1h;5)PBST洗板,加入稀釋后的HRP標記的羊抗兔抗體,每孔100μL,37℃反應1h;所述稀釋后的HRP標記的羊抗兔抗體是指,利用PBS稀釋濃度為5mgmL的HRP標記的羊抗兔抗體,稀釋比例為1:5000;6)PBST洗板,加入顯色液,每孔100μL,37℃反應15min;7)加入終止液,每孔50μL,輕微震蕩混勻,使用酶標儀測定OD450值,帶入標準線性方程計算出Cry毒素的殘留量;其中,Cry1Ab毒素線性方程為:Y=4.219*X-0.03659;Cry1Ac毒素線性方程為:Y=2.355*X+0.02928;Cry2Aa毒素線性方程為:Y=1.037*X+0.2214;Cry2Ab毒素線性方程為:Y=10*X+0.1930。
如需購買、轉讓、實施、許可或投資類似專利技術,可聯系本專利的申請人或專利權人江蘇省農業科學院,其通訊地址為:210014 江蘇省南京市玄武區鐘靈街50號;或者聯系龍圖騰網官方客服,聯系龍圖騰網可撥打電話0551-65771310或微信搜索“龍圖騰網”。
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