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龍圖騰網(wǎng)恭喜華中科技大學(xué)同濟醫(yī)學(xué)院附屬協(xié)和醫(yī)院申請的專利一種基于單細胞核轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)檢測主動脈瓣膜破骨細胞的方法獲國家發(fā)明授權(quán)專利權(quán)，本發(fā)明授權(quán)專利權(quán)由國家知識產(chǎn)權(quán)局授予，授權(quán)公告號為：CN117947152B 。

龍圖騰網(wǎng)通過國家知識產(chǎn)權(quán)局官網(wǎng)在2025-03-21發(fā)布的發(fā)明授權(quán)授權(quán)公告中獲悉：該發(fā)明授權(quán)的專利申請?zhí)?專利號為：202410106058.8，技術(shù)領(lǐng)域涉及：C12Q1/6883；該發(fā)明授權(quán)一種基于單細胞核轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)檢測主動脈瓣膜破骨細胞的方法是由李飛;徐力;鄭一聃;錢興宇;劉雨琦;董念國設(shè)計研發(fā)完成，并于2024-01-25向國家知識產(chǎn)權(quán)局提交的專利申請。

本一種基于單細胞核轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)檢測主動脈瓣膜破骨細胞的方法在說明書摘要公布了：本發(fā)明公開了一種基于單細胞核轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)檢測主動脈瓣膜破骨細胞的方法，屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。步驟如下：收集主動脈瓣膜組織置于高糖培養(yǎng)基中保存，然后應(yīng)用膠原酶工作液將組織裂解為單細胞懸液，隨后采用細胞篩過濾非細胞成分，過濾后裂解細胞并分離細胞核，運用單細胞核轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)對細胞進行轉(zhuǎn)錄組檢測。檢測結(jié)果表明，相較于此前應(yīng)用scRNA幾乎沒有捕獲到瓣膜組織破骨細胞的結(jié)果，本方案在總共44000余個細胞核中捕獲到了數(shù)千個可以被鑒定為破骨細胞或破骨細胞前體的細胞核，并獲取了其平均測序深度為10X的轉(zhuǎn)錄組結(jié)果。此外，其他細胞的組成和比例均無顯著變化，可說明該技術(shù)可靠。

本發(fā)明授權(quán)一種基于單細胞核轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)檢測主動脈瓣膜破骨細胞的方法在權(quán)利要求書中公布了：1.一種基于單細胞核轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)檢測主動脈瓣膜破骨細胞的方法，其特征在于，包括以下步驟：S1：獲取主動脈瓣膜組織，將其置于培養(yǎng)基中保存；S2：使用膠原酶工作液對主動脈瓣膜組織進行裂解制備主動脈瓣膜組織單細胞懸液；S3：對制得的單細胞懸液采用細胞篩過濾非細胞成分，利用細胞核提取試劑盒裂解細胞，并采用差速離心法獲取單細胞核懸液；S4：將單細胞核懸液采用單細胞核轉(zhuǎn)錄組檢測系統(tǒng)進行snRNA檢測，對測序結(jié)果應(yīng)用cellranger進行上游質(zhì)控和處理，應(yīng)用R軟件包Seurat和SCP進行下游分析；所述步驟S3中使用的細胞篩的孔徑為100μm；所述差速離心法工藝為將3-5mL0.1-0.5molL蔗糖溶液放入離心管中，然后沿管壁小心地加入1-5mL懸液覆蓋于上層；以500-1000×g離心5-15min，棄去上清，以2-8mL0.1-0.5molL預(yù)冷蔗糖溶液洗滌兩次，每次500-1000×g離心10-20min，獲得細胞核。

如需購買、轉(zhuǎn)讓、實施、許可或投資類似專利技術(shù)，可聯(lián)系本專利的申請人或?qū)＠麢?quán)人華中科技大學(xué)同濟醫(yī)學(xué)院附屬協(xié)和醫(yī)院，其通訊地址為：430000 湖北省武漢市江漢區(qū)解放大道1277；或者聯(lián)系龍圖騰網(wǎng)官方客服，聯(lián)系龍圖騰網(wǎng)可撥打電話0551-65771310或微信搜索“龍圖騰網(wǎng)”。