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龍圖騰網恭喜廣東忠信生物科技有限公司申請的專利高效篩選分泌單克隆抗體的雜交瘤細胞的方法及其應用獲國家發明授權專利權，本發明授權專利權由國家知識產權局授予，授權公告號為：CN115161311B 。

龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-05-06發布的發明授權授權公告中獲悉：該發明授權的專利申請號/專利號為：202211007203.4，技術領域涉及：C12N15/06；該發明授權高效篩選分泌單克隆抗體的雜交瘤細胞的方法及其應用是由唐勇;梁家杰;杜祎凡設計研發完成，并于2022-08-22向國家知識產權局提交的專利申請。

本高效篩選分泌單克隆抗體的雜交瘤細胞的方法及其應用在說明書摘要公布了：本發明公開了高效篩選分泌單克隆抗體的雜交瘤細胞的方法及其應用，涉及免疫學技術領域。本發明的方法通過將Oleyl?PEG?NHS與抗原偶聯后，得到Oleyl?PEG?NHS?抗原，在待篩選的脾臟細胞中加入Oleyl?PEG?NHS?抗原培養，棄上清，清洗；再加入熒光物質標記的抗鼠二抗孵育，棄上清，清洗；加入基礎培養基，用流式細胞儀對要篩選的細胞進行分選，獲得有熒光標記的細胞，即為特異性漿細胞群，將特異性漿細胞群與骨髓瘤細胞融合，在暗場下使用單細胞挑取儀對染色后的強陽性雜交瘤細胞進行挑取，即可得到分泌單克隆抗體的雜交瘤細胞。該方法高效快捷、準確率高，可用于快速篩選得到分泌單克隆抗體的雜交瘤細胞，從而能用于高效制備鼠源單克隆抗體。

本發明授權高效篩選分泌單克隆抗體的雜交瘤細胞的方法及其應用在權利要求書中公布了：1.一種高效篩選分泌單克隆抗體的雜交瘤細胞的方法，其特征在于，包括以下步驟：1將Oleyl-PEG-NHS與抗原偶聯，得到Oleyl-PEG-NHS-抗原；2將脾臟細胞清洗后，加入Oleyl-PEG-NHS-抗原，于37℃、5％CO2的條件下進行孵育180min，然后棄上清，清洗脾臟細胞；3將熒光物質標記的抗鼠二抗加入到步驟2處理好的脾臟細胞中，于37℃、5％CO2的條件下進行孵育120min，然后棄上清，清洗脾臟細胞；4將脾臟細胞通過流式細胞儀分選，分選出帶熒光標記的細胞，即為分泌特異性抗體的漿細胞；5將漿細胞與骨髓瘤細胞進行融合，得到雜交瘤細胞，其中，漿細胞的細胞數和骨髓瘤細胞的細胞數的比例為1：5～1：10；6將雜交瘤細胞按照步驟2和步驟3進行染色后，用單細胞挑取儀對具有強熒光的雜交瘤細胞進行挑取，得到分泌單克隆抗體的雜交瘤細胞；獲得脾臟細胞的步驟如下：1免疫4-6周雌性BALBc小鼠，初次免疫小鼠時需將體積比為1:1的抗原和弗氏完全佐劑混合乳化，抗原劑量為100μg只；之后每次免疫將抗原和弗氏不完全佐劑混合乳化，抗原劑量為100μg只；沖刺免疫時選擇無佐劑免疫，抗原劑量為50μg只；2ELISA間接法評估小鼠血清中抗體含量；3取小鼠脾臟，研磨過200目細胞篩后獲得脾臟細胞。

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