恭喜中國科學院大連化學物理研究所許國旺獲國家專利權
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龍圖騰網恭喜中國科學院大連化學物理研究所申請的專利一種表達載體及構建和應用與DU145細胞系獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN116218910B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-04-29發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202111476483.9,技術領域涉及:C12N15/867;該發明授權一種表達載體及構建和應用與DU145細胞系是由許國旺;羅圓媛;秦望舒;耿鵬宇;林志坤;路鑫設計研發完成,并于2021-12-06向國家知識產權局提交的專利申請。
本一種表達載體及構建和應用與DU145細胞系在說明書摘要公布了:本發明涉及生物技術領域,尤其涉及重組人固醇O?脂酰轉移酶1的表達載體、載體構建方法及表達方法。本發明針對固醇O?脂酰轉移酶1設計了合適的引物并擴增獲得cDNA,并通過融合His6?strep?EGFP標簽構建了包含上述cDNA的慢病毒載體。具體經過固醇O?脂酰轉移酶1基因全長的獲得,pCDH?His6?strep?EGFP?固醇O?脂酰轉移酶1質粒構建,包裝病毒,病毒侵染細胞,而后嘌呤霉素篩選,擴增后獲得SOAT1穩定過表達的DU145細胞系。
本發明授權一種表達載體及構建和應用與DU145細胞系在權利要求書中公布了:1.一種穩定高表達固醇O-脂酰轉移酶1的DU145細胞系,其特征在于,包括帶有重組人固醇O-脂酰轉移酶1序列的真核表達載體pCDH-CMV-MCS-EF1-puro;重組人固醇O-脂酰轉移酶1表達載體包含選自序列表1中所示的核苷酸序列或序列表3中所示的核苷酸序列的質粒;重組人固醇O-脂酰轉移酶1表達載體的構建,包括以下步驟:步驟1:設計引物,以DU145細胞的cDNA為模板,對所述人固醇O-脂酰轉移酶1的CDS序列進行擴增,回收目的片段SOAT1;所述人固醇O-脂酰轉移酶1的CDS序列如序列表1中所示的核苷酸序列的所示;步驟2:合成His6-strep-EGFP片段,設計引物通過PCR獲得His6-strep-EGFP-SOAT1片段;步驟3:將所述目的片段His6-strep-EGFP-SOAT1與pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro質粒進行同源重組,得到重組人固醇O-脂酰轉移酶1表達載體。
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