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龍圖騰網(wǎng)恭喜東南大學(xué)申請(qǐng)的專利用于檢測(cè)銀離子的雙色熒光共定位系統(tǒng)的制備方法及應(yīng)用獲國(guó)家發(fā)明授權(quán)專利權(quán)，本發(fā)明授權(quán)專利權(quán)由國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局授予，授權(quán)公告號(hào)為：CN114720444B 。

龍圖騰網(wǎng)通過(guò)國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局官網(wǎng)在2025-04-29發(fā)布的發(fā)明授權(quán)授權(quán)公告中獲悉：該發(fā)明授權(quán)的專利申請(qǐng)?zhí)?專利號(hào)為：202210350597.7，技術(shù)領(lǐng)域涉及：G01N21/64；該發(fā)明授權(quán)用于檢測(cè)銀離子的雙色熒光共定位系統(tǒng)的制備方法及應(yīng)用是由宗慎飛;郝晨輝;王著元;崔一平設(shè)計(jì)研發(fā)完成，并于2022-04-02向國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局提交的專利申請(qǐng)。

本用于檢測(cè)銀離子的雙色熒光共定位系統(tǒng)的制備方法及應(yīng)用在說(shuō)明書摘要公布了：本發(fā)明公開了一種用于銀離子檢測(cè)的雙色熒光共定位系統(tǒng)的制備方法及應(yīng)用。該系統(tǒng)使用具有525nm發(fā)射波長(zhǎng)的量子點(diǎn)和660nm發(fā)射波長(zhǎng)的Cy5熒光分子，其上分別偶聯(lián)富含胞嘧啶堿基的銀離子特異性DNA鏈。當(dāng)有銀離子時(shí)，游離的核酸適配體通過(guò)C?Ag+?C復(fù)合結(jié)構(gòu)進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì)，在熒光顯微鏡下進(jìn)行雙色超分辨成像，進(jìn)行量子點(diǎn)和Cy5分子的雙色熒光共定位。同時(shí)能夠檢測(cè)到量子點(diǎn)和Cy5熒光信號(hào)的位置為有效捕獲了銀離子的結(jié)合位點(diǎn)。利用雙色熒光超分辨共定位的方法，排除非特異性結(jié)合位點(diǎn)，極大提高了銀離子檢測(cè)的特異性，易于判別，靈敏度高、可靠性好。通過(guò)計(jì)算量子點(diǎn)與Cy5熒光信號(hào)共定位系數(shù)，實(shí)現(xiàn)銀離子濃度的定量檢測(cè)。

本發(fā)明授權(quán)用于檢測(cè)銀離子的雙色熒光共定位系統(tǒng)的制備方法及應(yīng)用在權(quán)利要求書中公布了：1.一種雙色熒光共定位系統(tǒng)，其特征在于：使用具有525nm發(fā)射波長(zhǎng)的量子點(diǎn)和660nm發(fā)射波長(zhǎng)的Cy5熒光分子，其上分別偶聯(lián)富含胞嘧啶堿基的銀離子特異性DNA鏈，當(dāng)系統(tǒng)引入銀離子時(shí)，游離的核酸適配體特異性識(shí)別銀離子，通過(guò)C-Ag+-C復(fù)合結(jié)構(gòu)進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì)，在熒光顯微鏡下進(jìn)行雙色超分辨成像，進(jìn)行量子點(diǎn)和Cy5分子的雙色熒光共定位；只有同時(shí)檢測(cè)到量子點(diǎn)和Cy5熒光信號(hào)的位點(diǎn)才是銀離子特異性反應(yīng)位點(diǎn)，以此排除非特異性的熒光信號(hào)，并通過(guò)共定位系數(shù)值進(jìn)行銀離子定量檢測(cè)；制備所述的雙色熒光共定位系統(tǒng)的方法，包含以下步驟：（1）在羧基水溶性ZnCdSeZnS量子點(diǎn)溶液中加入NHS和EDC，混合均勻，再加入氨基修飾核酸適配體NH2-DNA，室溫下?lián)u床反應(yīng)，用超濾管對(duì)反應(yīng)物進(jìn)行超濾純化，將其分散在PBS緩沖液中，得QD@NH2-DNA溶液；（2）將步驟（1）中所得的QD@NH2-DNA溶液，加入Cy5熒光基團(tuán)標(biāo)記的核酸適配體Cy5-DNA，混合均勻，得QD@NH2-DNA@Cy5-DNA，即可特異性識(shí)別銀離子的雙色熒光共定位系統(tǒng)；步驟（1）中，所述羧基水溶性ZnCdSeZnS量子點(diǎn)與EDC的摩爾比為1:2000-5000；步驟（1）中，所述NHS與EDC的摩爾比為1:4-10；步驟（1）中，所述羧基水溶性ZnCdSeZnS量子點(diǎn)與NH2-DNA的摩爾比為1:100；步驟（1）中，所述NH2-DNA序列為5’-NH2C6-GTCCACCCAAGG-3’；步驟（2）中，所述Cy5-DNA與羧基水溶性ZnCdSeZnS量子點(diǎn)的摩爾比為1:2；步驟（1）中，所述Cy5-DNA序列為5’-CCTTGCCTGGAC-Cy5-3’。

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