恭喜江南大學龐慶豐獲國家專利權
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龍圖騰網恭喜江南大學申請的專利一種小鼠條件性誘導Hmox1基因敲除模型的構建方法及應用獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN116019063B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-04-29發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202211296862.4,技術領域涉及:C12N15/90;該發明授權一種小鼠條件性誘導Hmox1基因敲除模型的構建方法及應用是由龐慶豐;吳亞先;高智琦;陳丹;張艷麗;李勝朋;滿凌云設計研發完成,并于2022-10-21向國家知識產權局提交的專利申請。
本一種小鼠條件性誘導Hmox1基因敲除模型的構建方法及應用在說明書摘要公布了:本發明公開了一種小鼠條件性誘導Hmox1基因敲除模型的構建方法及應用,屬于生物技術領域。本發明提供的小鼠條件性誘導Hmox1基因敲除模型由以下步驟構建:構建同源重組DNA載體;通過體外轉錄獲得Cas9mRNA和針對Hmox1基因的gRNA;將同源重組DNA載體、Cas9mRNA和gRNA注射到小鼠的受精卵中;培育獲得條件性基因敲除小鼠;通過測序和核酸膠電泳鑒定基因型;得到的條件性敲除小鼠與其他組織特異性表達Cre的小鼠雜交獲得相應組織或細胞條件性敲除小鼠,從而實現特定組織或細胞類型的精準研究;并且證明Hmox1誘導性條件性敲除明顯加重急性肺損傷。本發明能夠克服現有技術中Hmox1全身基因敲除小鼠胚胎致死,無法構建小鼠模型的困難,輔助Hmox1在疾病中的研究。
本發明授權一種小鼠條件性誘導Hmox1基因敲除模型的構建方法及應用在權利要求書中公布了:1.一種構建Hmox1誘導性基因敲除小鼠動物模型的方法,其特征在于,所述方法為:(1)針對FloxP位點設計Cas9gRNA和DonorDNA質粒,在第二個外顯子的兩邊定點插入FloxP位點,所述第二個外顯子的氨基酸序列如SEQIDNO.28所示,gRNA的序列如SEQIDNO.25或SEQIDNO.26所示;(2)將DonorDNA質粒以及Cas9gRNA植入野生型小鼠的受精卵中,并將受精卵移植至野生型小鼠,該小鼠產下仔鼠即F0代小鼠;(3)將F0代小鼠與野生型小鼠雜交,獲得F1代雜合子;(4)將F1代雜合子互配,繁育得到F2代小鼠,即為Hmox1-FloxP小鼠;(5)將Hmox1-FloxP小鼠與組織特異性表達Cre的小鼠雜交獲得穩定遺傳子代。
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