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龍圖騰網恭喜廣東藥科大學申請的專利一種基于CRISPR/Cas12a與DNAzyme的堿性磷酸酶活性檢測方法獲國家發明授權專利權，本發明授權專利權由國家知識產權局授予，授權公告號為：CN114965412B 。

龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-04-01發布的發明授權授權公告中獲悉：該發明授權的專利申請號/專利號為：202210621552.9，技術領域涉及：G01N21/64；該發明授權一種基于CRISPR/Cas12a與DNAzyme的堿性磷酸酶活性檢測方法是由鄒李;賴余芬設計研發完成，并于2022-06-02向國家知識產權局提交的專利申請。

本一種基于CRISPR/Cas12a與DNAzyme的堿性磷酸酶活性檢測方法在說明書摘要公布了：本發明屬于生物技術領域，具體涉及一種基于CRISPRCas12a與DNAzyme的堿性磷酸酶活性檢測方法。本發明利用堿性磷酸酶特異性催化PPi焦磷酸的水解反應提高該方法對堿性磷酸酶的檢測特異性，具體的：堿性磷酸酶催化PPi水解后，未被PPi絡合的Cu2+可以輔助DNAzyme催化切割底物鏈。被切割的底物鏈不能進一步與Cas12acrRNA的二元復合物結合，CRISPRCas12a反式切割活性被沉默，不能裂解單鏈DNA報告探針，熒光被淬滅，通過DNA報告探針的熒光強度即可對堿性磷酸酶進行特異性分析。本發明方法操作簡便、靈敏度高、選擇性好，可用于檢測多種生物活性物質中的堿性磷酸酶活性。

本發明授權一種基于CRISPR/Cas12a與DNAzyme的堿性磷酸酶活性檢測方法在權利要求書中公布了：1.一種用于非診斷目的的基于CRISPRCas12a與DNAzyme的堿性磷酸酶活性檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：S1、PPi水解：將不同活性濃度的堿性磷酸酶標準品與PPi、Cu2+以及緩沖溶液混勻后孵育，以水解PPi，使PPi無法與Cu2+結合；S2、DNAzyme切割：將Cu2+特異性DNAzyme與步驟S1得到的溶液混合，再加入抗壞血酸混勻后孵育，以充分切割底物鏈，所述DNAzyme包括底物鏈和酶鏈；S3、CRISPRCas12a反式切割：Cas12acrRNA復合物與步驟S2得到的溶液混勻，再加入切割緩沖溶液、二硫蘇糖醇以及單鏈DNA報告探針混勻，繼續孵育，使完整的底物鏈激活Cas12a蛋白反式切割活性，導致單鏈DNA報告探針斷裂；S4、熒光分光光度計檢測：CRISPRCas12a反式切割產物通過熒光分光光度計得到信號，根據信號值與活性濃度之間的關系構建標準曲線；S5、將待測樣品代替標準品進行檢測以獲得熒光信號，根據待測樣品的熒光信號值與標準曲線計算獲得待測樣品中的堿性磷酸酶活性。

如需購買、轉讓、實施、許可或投資類似專利技術，可聯系本專利的申請人或專利權人廣東藥科大學，其通訊地址為：510240 廣東省廣州市海珠區寶崗光漢直街40號；或者聯系龍圖騰網官方客服，聯系龍圖騰網可撥打電話0551-65771310或微信搜索“龍圖騰網”。