恭喜中元匯吉生物技術股份有限公司董璐獲國家專利權
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龍圖騰網恭喜中元匯吉生物技術股份有限公司申請的專利一種對核酸提取裂解液中異硫氰酸胍耐受時間延長的蛋白酶K突變體及其應用獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN116334051B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-04-01發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202211616133.2,技術領域涉及:C12N9/58;該發明授權一種對核酸提取裂解液中異硫氰酸胍耐受時間延長的蛋白酶K突變體及其應用是由董璐;陳威;趙偉;王建琴設計研發完成,并于2022-12-15向國家知識產權局提交的專利申請。
本一種對核酸提取裂解液中異硫氰酸胍耐受時間延長的蛋白酶K突變體及其應用在說明書摘要公布了:本發明公開了一種對核酸提取裂解液中異硫氰酸胍耐受時間延長的蛋白酶K突變體及其應用。本發明通過對野生型蛋白酶K進行組合定向改造,在SEQIDNO.1所示的氨基酸序列的基礎上,將第151位的酪氨酸突變為丙氨酸,第208位的賴氨酸突變為組氨酸,第273的絲氨酸突變為蘇氨酸,第293位的甘氨酸突變為丙氨酸。本發明提供的蛋白酶K突變體相比野生型蛋白酶K更加耐受高濃度的異硫氰酸胍,在25℃下,核酸提取裂解液處理后30分鐘時殘余活力不受影響;處理60分鐘時仍然能保持80%以上殘余活力,而此時野生型蛋白酶K殘余活力僅為28%。由此提高了蛋白酶K對核酸提取試劑盒的核酸提取裂解液的耐受能力。
本發明授權一種對核酸提取裂解液中異硫氰酸胍耐受時間延長的蛋白酶K突變體及其應用在權利要求書中公布了:1.一種對核酸提取裂解液中異硫氰酸胍耐受時間延長的蛋白酶K突變體,其特征在于,其氨基酸序列由SEQIDNO.1所示序列突變而來,所述蛋白酶K突變體選自如下任一種:1對應于SEQIDNO.1的第151位的酪氨酸突變為丙氨酸和第208位的賴氨酸突變為組氨酸;2對應于SEQIDNO.1的第151位的酪氨酸突變為丙氨酸和第273的絲氨酸突變為蘇氨酸;3對應于SEQIDNO.1的第208位的賴氨酸突變為組氨酸和第273的絲氨酸突變為蘇氨酸;4對應于SEQIDNO.1的第208位的賴氨酸突變為組氨酸、第273的絲氨酸突變為蘇氨酸和第293位的甘氨酸突變為丙氨酸;所述突變體的氨基酸序列如SEQIDNO.3、4、6、11任一種所示。
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