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龍圖騰網(wǎng)恭喜長白山皇封參業(yè)股份有限公司申請的專利一種提高紅參皂苷RG3的制備方法獲國家發(fā)明授權(quán)專利權(quán)，本發(fā)明授權(quán)專利權(quán)由國家知識產(chǎn)權(quán)局授予，授權(quán)公告號為：CN119662764B 。

龍圖騰網(wǎng)通過國家知識產(chǎn)權(quán)局官網(wǎng)在2025-05-30發(fā)布的發(fā)明授權(quán)授權(quán)公告中獲悉：該發(fā)明授權(quán)的專利申請?zhí)?專利號為：202510187253.2，技術(shù)領(lǐng)域涉及：C12P33/20；該發(fā)明授權(quán)一種提高紅參皂苷RG3的制備方法是由高慶海;李玉勝;馬東方設(shè)計研發(fā)完成，并于2025-02-20向國家知識產(chǎn)權(quán)局提交的專利申請。

本一種提高紅參皂苷RG3的制備方法在說明書摘要公布了：本發(fā)明方法公開一種提高紅參皂苷RG3的制備方法，本發(fā)明申請涉及制藥技術(shù)領(lǐng)域，本發(fā)明方法通過建立β?葡萄糖苷酶和α?L?阿拉伯糖苷酶的雙酶協(xié)同催化體系，實現(xiàn)了對C?20位糖苷鍵的立體選擇性水解，選擇性達95%以上；采用經(jīng)定向篩選的菌株，通過優(yōu)化發(fā)酵條件和添加0.1%人參皂苷Rb1誘導(dǎo)物，使目標酶基因表達量提高2.5倍，酶活性提升50%；通過添加5%甘油和0.1%Tween?80的復(fù)合穩(wěn)定劑體系，使酶活性半衰期延長1.8倍，并在38?42℃的溫度控制下實現(xiàn)48小時轉(zhuǎn)化率90%以上；采用超濾?樹脂?結(jié)晶的多重分離策略，確保最終產(chǎn)品純度≥98%，為規(guī)模化生產(chǎn)提供了可靠的工藝基礎(chǔ)。

本發(fā)明授權(quán)一種提高紅參皂苷RG3的制備方法在權(quán)利要求書中公布了：1.一種提高紅參皂苷RG3的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：S1試劑配制：配制0.15-0.25M磷酸鹽緩沖液并調(diào)節(jié)pH至5.2-5.8；稱取紅參中提取的人參皂苷Rb1Rb2Rc混合物2-4g溶于100mL緩沖液中制成2-4%底物溶液；按照β-葡萄糖苷酶80-100Ug、α-L-阿拉伯糖苷酶40-60Ug、輔助酶系20-30Ug的比例配制酶液；另配制含4-6%甘油和0.05-0.15%Tween-80的穩(wěn)定劑混合溶液，同時制備基礎(chǔ)培養(yǎng)基，每升培養(yǎng)基包含：葡萄糖15-25g、酵母膏3-7g、蛋白胨8-12g、KH2PO41.5-2.5g、MgSO40.3-0.7g，120-122℃滅菌15-20分鐘備用；S2菌種培養(yǎng)：菌種活化從-80℃保存的地衣芽孢桿菌開始，首先將其接種于斜面培養(yǎng)基，26-30℃培養(yǎng)45-50小時后挑取單菌落接種于種子培養(yǎng)基中，在26-30℃、160-200rpm條件下培養(yǎng)22-26小時，發(fā)酵培養(yǎng)階段將種子液按4-6%的接種量轉(zhuǎn)入發(fā)酵培養(yǎng)基，控制發(fā)酵溫度26-30℃，攪拌速度160-200rpm，維持溶氧水平在35-65%，發(fā)酵22-26小時后添加0.08-0.12%人參皂苷Rb1作為誘導(dǎo)物；S3酶促轉(zhuǎn)化：酶促轉(zhuǎn)化階段，向發(fā)酵液中加入預(yù)先配制的底物溶液和穩(wěn)定劑混合液，將反應(yīng)溫度調(diào)節(jié)至38-42℃，保持160-200rpm攪拌，轉(zhuǎn)化過程中每1.5-2.5小時取樣監(jiān)測轉(zhuǎn)化進度，反應(yīng)持續(xù)時間為45-50小時，轉(zhuǎn)化結(jié)束后進入分離純化階段：首先將發(fā)酵液在3800-4200rpm離心12-18分鐘，上清液經(jīng)0.45μm濾膜過濾后使用8-12kDa超濾膜進行膜分離；S4分離純化：分離得到的濾液通過D101大孔樹脂柱進行純化，依次使用純水洗脫去除極性雜質(zhì)，然后用25-35%、45-55%、65-75%乙醇進行梯度洗脫，收集目標洗脫段，將收集到的目標組分減壓濃縮至適宜濃度，加入適量結(jié)晶助劑，在2-6℃條件下靜置結(jié)晶22-26小時，結(jié)晶完成后通過抽濾收集晶體，38-42℃真空干燥得到成品。

如需購買、轉(zhuǎn)讓、實施、許可或投資類似專利技術(shù)，可聯(lián)系本專利的申請人或?qū)＠麢?quán)人長白山皇封參業(yè)股份有限公司，其通訊地址為：134300 吉林省白山市靖宇縣花園鎮(zhèn)巴里村；或者聯(lián)系龍圖騰網(wǎng)官方客服，聯(lián)系龍圖騰網(wǎng)可撥打電話0551-65771310或微信搜索“龍圖騰網(wǎng)”。