恭喜江南大學;鄭州海關技術中心王周平獲國家專利權
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龍圖騰網恭喜江南大學;鄭州海關技術中心申請的專利一種基于適配體熒光探針同時檢測棒曲霉毒素和赭曲霉毒素A的方法獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN114965391B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-05-23發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202210421813.2,技術領域涉及:G01N21/64;該發明授權一種基于適配體熒光探針同時檢測棒曲霉毒素和赭曲霉毒素A的方法是由王周平;郭華麟;馬鵬飛;郭會清;李軻;張淑霞設計研發完成,并于2022-04-21向國家知識產權局提交的專利申請。
本一種基于適配體熒光探針同時檢測棒曲霉毒素和赭曲霉毒素A的方法在說明書摘要公布了:本發明提供了一種基于適配體熒光探針同時檢測棒曲霉毒素和赭曲霉毒素A的方法。所述方法是通過合成兩種熒光顯著增強的金納米簇,并分別以棒曲霉毒素與赭曲霉毒素A的適配體進行修飾,得到兩種熒光探針Cys@BSAAuNCs?Apt1與Arg@ATTAuNCs?Apt2。這兩種熒光探針可以在同一個波長405nm下激發,分別得到兩個發射峰650nm與530nm。本發明首次報道了利用兩種金納米簇修飾的適配體探針同時檢測蘋果汁中棒曲霉毒素與赭曲霉毒素A的方法。相比于傳統檢測真菌毒素的方法,本發明的方法具有特異性強、靈敏度高、生物相容性高、檢測限低、成本低、便于操作等特點。
本發明授權一種基于適配體熒光探針同時檢測棒曲霉毒素和赭曲霉毒素A的方法在權利要求書中公布了:1.一種基于適配體熒光探針同時檢測棒曲霉毒素和赭曲霉毒素A的方法,其特征在于,包括以下步驟:取Cys@BSAAuNCs-Apt1與Arg@ATTAuNCs-Apt2和SA@MNP-cDNA1與SA@MNP-cDNA2混勻,避光混合反應,然后加入棒曲霉毒素與赭曲霉毒素A,混勻孵育,待反應結束后,取混合反應液的上清液并檢測上清液的熒光強度,實現棒曲霉毒素和赭曲霉毒素A的定性或定量分析;所述Cys@BSAAuNCs-Apt1通過以下方法制備得到:S1:將牛血清白蛋白水溶液與HAuCl4溶液攪拌混合反應,并將反應液pH調節至堿性,混勻孵育,后加入L-半胱氨酸進行反應得到Cys@BSAAuNCs;S2:將S1中所得Cys@BSAAuNCs溶于緩沖液中,并加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽與N-羥基琥珀酰亞胺進行孵育,再加入氨基修飾的棒曲霉毒素的適配體Apt1,避光反應得到所述熒光探針Cys@BSAAuNCs-Apt1;所述適配體的序列為5’-CGACTTCGAGTCAAGGCGCTAACGAAGTGT-3’;所述Arg@ATTAuNCs-Apt2通過以下方法制備得到:將6-氮雜-2-硫代胸腺嘧啶的堿性溶液加入HAuCl4溶液中,避光混勻反應,并加入L-精氨酸混合進行反應,得到Arg@ATTAuNCs;將Arg@ATTAuNCs溶于緩沖溶液中,加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽與N-羥基琥珀酰亞胺混合孵育,再加入氨基修飾的赭曲霉毒素A的適配體Apt2,避光孵育,得到所述熒光探針Arg@ATTAuNCs-Apt2;所述適配體的序列為5’-GATCGGGTGTGGGTGGCGTAAAGGGAGCATCGGACA-3’;所述SA@MNP-cDNA1通過以下方法制備得到:取預處理后的磁珠溶液SA@MNP,并與生物素修飾的棒曲霉毒素互補鏈混勻并反應,經過磁珠分離得到所述SA@MNP-cDNA1;所述棒曲霉毒素互補鏈的序列為5’-CGAAGTCG-3’;所述SA@MNP-cDNA2通過以下方法制備得到:取預處理后的磁珠溶液SA@MNP,并與生物素修飾的赭曲霉毒素A互補鏈混勻并反應,經過磁珠分離得到所述SA@MNP-cDNA2;所述赭曲霉毒素A互補鏈的序列為5’-ACCCGATC-3’;其中,SA@MNP為納米磁珠與鏈霉親和素偶聯而成的磁珠。
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