恭喜山東第一醫科大學附屬省立醫院(山東省立醫院)韓波獲國家專利權
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龍圖騰網恭喜山東第一醫科大學附屬省立醫院(山東省立醫院)申請的專利一種心肌細胞來源的限定尺寸的細胞外囊泡及其制備方法與應用獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN119464194B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-05-23發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202510058452.3,技術領域涉及:C12N5/077;該發明授權一種心肌細胞來源的限定尺寸的細胞外囊泡及其制備方法與應用是由韓波;由穎男;姜艷杰設計研發完成,并于2025-01-15向國家知識產權局提交的專利申請。
本一種心肌細胞來源的限定尺寸的細胞外囊泡及其制備方法與應用在說明書摘要公布了:本發明涉及生物醫藥技術領域,具體涉及一種心肌細胞來源的限定尺寸的細胞外囊泡及其制備方法與應用。本發明中通過采用脂多糖(LPS)刺激心肌細胞H9C2,誘導其產生心肌炎癥細胞,并使用差速離心法從誘導產生的心肌炎癥細胞中分離出限定尺寸的細胞外囊泡,研究發現該限定尺寸的細胞外囊泡可以抑制炎癥狀態下的巨噬細胞分泌炎癥因子,使巨噬細胞向抗炎修復表型(M2)轉化。同時,在心肌炎小鼠中,大細胞外囊泡可以減輕心肌炎癥狀態,有緩解心肌炎的效果。
本發明授權一種心肌細胞來源的限定尺寸的細胞外囊泡及其制備方法與應用在權利要求書中公布了:1.一種心肌細胞來源的限定尺寸的細胞外囊泡在制備治療心肌炎藥物中的應用;其中,心肌細胞來源的限定尺寸的細胞外囊泡的制備方法,包括如下步驟:(1)培養心肌細胞,并誘導其產生心肌炎癥細胞;(2)繼續培養誘導產生的心肌炎癥細胞,后吸取培養基中的上清液;(3)將上清液進行差速離心,收集限定尺寸的細胞外囊泡;其中,步驟(1)中所述心肌細胞為H9C2;所述限定尺寸的細胞外囊泡的粒徑為100~600nm,峰值為175nm;步驟(1)中具體的方法包括:培養心肌細胞至生長密度為60~80%,更換無血清的DMEM培養基繼續培養10~14h,培養后進行換液,再次更換無血清的DMEM培養基,同時加入終濃度為1~2μgmL脂多糖培養20~30h誘導產生心肌炎癥細胞;步驟(3)中差速離心的方式包括:在3~5℃的條件下,280~320g離心9~12min,收集上清液;在3~5℃的條件下,1900~2200g離心18~22min,收集上清液;在3~5℃的條件下,9000~12000g離心28~32min,收集沉淀;采用PBS緩沖溶液洗滌沉淀后,在3~5℃的條件下,9000~12000g離心28~32min,收集沉淀,獲取限定尺寸的細胞外囊泡。
如需購買、轉讓、實施、許可或投資類似專利技術,可聯系本專利的申請人或專利權人山東第一醫科大學附屬省立醫院(山東省立醫院),其通訊地址為:250000 山東省濟南市槐蔭區經五緯七路324號;或者聯系龍圖騰網官方客服,聯系龍圖騰網可撥打電話0551-65771310或微信搜索“龍圖騰網”。
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