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龍圖騰網恭喜南京林業大學申請的專利一種培育轉抗旱基因楊樹的方法獲國家發明授權專利權，本發明授權專利權由國家知識產權局授予，授權公告號為：CN115491387B 。

龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-05-16發布的發明授權授權公告中獲悉：該發明授權的專利申請號/專利號為：202211178390.2，技術領域涉及：C12N15/84；該發明授權一種培育轉抗旱基因楊樹的方法是由孫甜甜;張往祥;張一;范俊俊;閆新陽;衡啟蒙設計研發完成，并于2022-09-26向國家知識產權局提交的專利申請。

本一種培育轉抗旱基因楊樹的方法在說明書摘要公布了：本發明公開了一種培育轉抗旱基因楊樹的方法，屬于植物基因工程技術領域。本發明以優良楊樹品種為植物材料，通過目的基因克隆、載體構建、農桿菌侵染液的制備、楊樹葉片遺傳轉化，獲得轉基因抗旱楊樹。其中，農桿菌侵染液中含有根據樹種的營養需求改進的AAM重懸培養基，楊樹葉片遺傳轉化階段培養基中含有TDZ和Carb，改進的AAM重懸培養基可充分提高菌液活性和轉化效率，加速芽的生長并提高出芽率和陽性率，與Carb的專適搭配可有效保證陽性率并抑制農桿菌的過量生長，TDZ加速葉片細胞分化，不經愈傷組織可直接長出芽點，縮短轉化周期，實現高效轉化，陽性率可高達62.5％，可加速耐旱型楊樹的育種進程。

本發明授權一種培育轉抗旱基因楊樹的方法在權利要求書中公布了：1.一種培育轉抗旱基因楊樹的方法，其特征在于，包括以下步驟：1構建楊樹耐干旱脅迫基因的植物表達載體；2將所構建的楊樹耐干旱脅迫基因的植物表達載體轉入農桿菌；3將含有楊樹耐干旱脅迫基因的重組農桿菌用改進的AAM重懸培養基進行重懸，至OD600為0.6-0.9時，加入200μmolLAS制成農桿菌侵染液；所述改進的AAM重懸培養基的配方為：蔗糖68500mgL+葡萄糖36000mgL+KCl3000mgL+谷氨酰胺900mgL+酸水解酪蛋白500mgL+MgSO4250mgL+KH2PO4185mgL+精氨酸176mgL+CaCl2·2H2O150mgL+肌醇100mgL+FeNaEDTA36.7mgL+VB110mgL+MnSO4·H2O7.58mgL+甘氨酸7.5mgL+H3BO33mgL+ZnSO4·7H2O2megL+煙酸1mgL+VB61mggL+KI0.8mggL+Na2MoO4·2H2O0.25mgL+CoCl2·6H2O0.025mgL+CuSO4·5H2O0.025mgL；4選擇生長狀態良好的楊樹組培苗，取頂端幼嫩的葉片為植物材料，去除主葉脈和葉尖，在葉脈處進行創傷處理，置于MS分化培養基中預培養24h；將預培養的葉片取出，置于侵染液中侵染，結束后將葉片取出，用濾紙吸干，放回MS分化培養基中，在黑暗條件下倒置3d；5將MS分化培養基中的葉片取出，用無菌水沖洗后，再用含有Carb的水沖洗，濾紙吸干后轉入MS選擇培養基中培養7d；6將MS選擇培養基中的葉片轉入MS篩選培養基中進行培養，每10d更換一次篩選培養基，期間不經愈傷組織直接長出芽點，待第3次更換培養基時，將其轉至裝有轉化植物生根培養基的無菌組培瓶中，獲得轉抗旱基因楊樹苗；步驟1中，使用的楊樹耐干旱脅迫基因為Potri.008G065600；步驟2中，使用的農桿菌為GV3101農桿菌；步驟4中，所述MS分化培養基的配方為：MS+NAA0.05mgL+6-BA0.5mgL+TDZ0.01mgL+蔗糖30gL+植物凝膠4.2gL+AS200μmolL，pH＝5.8-6.0；步驟5中，將MS分化培養基中的葉片取出，用無菌水沖洗5-6次后，再用含有400mgLCarb的水沖洗。

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