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龍圖騰網(wǎng)恭喜上海市第一人民醫(yī)院申請(qǐng)的專(zhuān)利一種PEG-G5.NH2-FITC-DOTA(Gd)-Monalizumab/IPH4301納米探針及其應(yīng)用獲國(guó)家發(fā)明授權(quán)專(zhuān)利權(quán)，本發(fā)明授權(quán)專(zhuān)利權(quán)由國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局授予，授權(quán)公告號(hào)為：CN116019937B 。

龍圖騰網(wǎng)通過(guò)國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局官網(wǎng)在2025-05-16發(fā)布的發(fā)明授權(quán)授權(quán)公告中獲悉：該發(fā)明授權(quán)的專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?專(zhuān)利號(hào)為：202310053351.8，技術(shù)領(lǐng)域涉及：A61K49/10；該發(fā)明授權(quán)一種PEG-G5.NH2-FITC-DOTA(Gd)-Monalizumab/IPH4301納米探針及其應(yīng)用是由李康安;王梓霖;郭鑫宇;嵇再雄設(shè)計(jì)研發(fā)完成，并于2023-01-31向國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局提交的專(zhuān)利申請(qǐng)。

本一種PEG-G5.NH2-FITC-DOTA(Gd)-Monalizumab/IPH4301納米探針及其應(yīng)用在說(shuō)明書(shū)摘要公布了：本發(fā)明涉及一種PEG?G5.NH2?FITC?DOTAGd?MonalizumabIPH4301納米探針及其應(yīng)用，對(duì)制備的納米探針進(jìn)行表征，通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)分析納米材料和NK?92MI細(xì)胞的結(jié)合能力和應(yīng)用MRI對(duì)納米探針標(biāo)記的NK?92MI細(xì)胞體外成像并分析其T1加權(quán)T1WI的信號(hào)改變，還采用Westernblot檢測(cè)共培養(yǎng)后乳腺癌MDA?MB?231細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)以及Elisa法檢測(cè)培養(yǎng)體系內(nèi)的IFN?γ的表達(dá)量，發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的PEG?G5.NH2?FITC?DOTAGd?MonalizumabIPH4301納米探針能夠結(jié)合NK?92MI細(xì)胞，利用3.0TMRI可對(duì)其進(jìn)行體外成像，并在Monalizumab和IPH4301雙抗體修飾后納米探針促進(jìn)了NK?92MI細(xì)胞釋放IFN?γ，且增強(qiáng)了其對(duì)MDA?MB?231細(xì)胞的殺傷能力，為生物體內(nèi)成像和免疫治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

本發(fā)明授權(quán)一種PEG-G5.NH2-FITC-DOTA(Gd)-Monalizumab/IPH4301納米探針及其應(yīng)用在權(quán)利要求書(shū)中公布了：1.一種PEG-G5.NH2-FITC-DOTAGd-MonalizumabIPH4301納米探針，其特征在于，所述的納米探針由以下步驟制備而成：a將G5.NH2溶解于1ml的DMSO中，同時(shí)將DOTA-NHS溶解于4ml的超純水中在攪拌的情況下逐滴加入到G5.NH2溶液中，于室溫下磁力攪拌反應(yīng)24h后，加入溶解在1ml水中GdNO33·6H2O，置于室溫下持續(xù)攪拌反應(yīng)24h以此來(lái)螯合GdⅢ離子，將混合的反應(yīng)物用纖維素透析膜在蒸餾水中透析1天，得到G5.NH2-DOTAGd溶液；b將PEG2K-COOH溶解在5ml的DMSO中，逐滴加入溶解在2mlDMSO中的EDC，并在室溫下進(jìn)行磁力攪拌反應(yīng)半小時(shí)，加入溶解在2ml超純水中的NHS-sulfo，并在室溫下持續(xù)攪拌活化3小時(shí)；c將活化后的PEG2K-COOH逐滴加入步驟a得到的G5.NH2-DOTAGd，置于室溫下磁力攪拌反應(yīng)24h。將混合的反應(yīng)物用纖維素透析膜在蒸餾水中透析1天，得到PEG-G5.NH2-DOTAGd；d將FITC溶解于1ml的DMSO中，逐滴加入上述得到的PEG-G5.NH2-DOTAGd中，隨后將兩者混勻置于室溫下磁力攪拌反應(yīng)24小時(shí)，將混合的反應(yīng)物用纖維素透析膜在蒸餾水中透析24h，得到靶向納米探針NPsPEG-G5.NH2-DOTAGd-FITC；e將SMCC溶解于1ml的DMF中，隨后加入0.1M磷酸鹽緩沖液稀釋至1mgml。將上述混合液分別加入至Monalizumab、IPH4301抗體內(nèi)，置于室溫下反應(yīng)1h，然后使用超濾管純化獲得的產(chǎn)物；f使用Traut‘s試劑在靶向納米探針表面引入巰基，將10倍于伯胺基團(tuán)數(shù)量Traut‘s試劑溶解在0.1M磷酸鹽緩沖液中。在PH＝8.0、N2的條件下持續(xù)反應(yīng)1h，并通過(guò)超濾管提純產(chǎn)物。將活化后的Monalizumab、IPH4301單克隆抗體與修飾后的NPs以1：100的摩爾比進(jìn)行反應(yīng)，得到最終產(chǎn)物NPS-MonalizumabIPH4301。

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