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恭喜成都大熊貓繁育研究基地安俊輝獲國家專利權

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龍圖騰網(wǎng)恭喜成都大熊貓繁育研究基地申請的專利一種大熊貓永生化腎細胞系GPK-1、制備方法和用途獲國家發(fā)明授權專利權,本發(fā)明授權專利權由國家知識產(chǎn)權局授予,授權公告號為:CN119776258B

龍圖騰網(wǎng)通過國家知識產(chǎn)權局官網(wǎng)在2025-05-16發(fā)布的發(fā)明授權授權公告中獲悉:該發(fā)明授權的專利申請?zhí)?專利號為:202510286344.1,技術領域涉及:C12N5/071;該發(fā)明授權一種大熊貓永生化腎細胞系GPK-1、制備方法和用途是由安俊輝;劉玉良;侯蓉;肖瀟;李紅艷;王東輝;李媛;陳佳松設計研發(fā)完成,并于2025-03-12向國家知識產(chǎn)權局提交的專利申請。

一種大熊貓永生化腎細胞系GPK-1、制備方法和用途在說明書摘要公布了:本發(fā)明公開了一種大熊貓永生化腎細胞系GPK?1、制備方法和用途,屬于永生化細胞技術領域。其制備方法如下:(1)采集已死亡大熊貓的腎臟組織,將其置于保護液中浸泡;(2)對經(jīng)步驟(1)處理后的腎臟組織進行兩步消化;(3)對消化后的細胞進行培養(yǎng)傳代,然后用攜帶neomycin抗性基因與SV40?LT基因的慢病毒感染傳代細胞,再篩選建立大熊貓永生化腎細胞系。本發(fā)明提供了一種大熊貓腎源細胞高效分離、培養(yǎng)技術,并建立了一株永生化大熊貓腎源細胞系GPK?1。與大熊貓原代腎臟細胞進行對比,GPK?1保留了正常的核型與相關分子特性,并在細胞傳代次數(shù)、增殖效率以及轉染效率方面得到了顯著提升。

本發(fā)明授權一種大熊貓永生化腎細胞系GPK-1、制備方法和用途在權利要求書中公布了:1.一種大熊貓永生化腎細胞系的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:1采集已死亡大熊貓的腎臟組織,將其置于保護液中浸泡10~20min;所述保護液包括濃度為50~80μM的白藜蘆醇、濃度為30~50μM的褪黑素以及濃度為50~100μgmL大熊貓乳汁細胞外泌體提取物;所述大熊貓乳汁細胞外泌體提取物的制備方法如下:取培養(yǎng)1-5代的大熊貓乳汁細胞,待細胞匯合度達80%時,棄去完全培養(yǎng)基,清洗貼壁細胞后加入不含F(xiàn)BS的低糖DMEM培養(yǎng)48h,收集細胞上清液并離心分離獲得大熊貓乳汁細胞外泌體提取物;2對經(jīng)步驟1處理后的腎臟組織進行兩步消化;兩步消化的具體過程為:于37℃,用消化液I水浴消化10~15min,離心后,再用消化液II繼續(xù)水浴消化10~15min;所述消化液I包括DMEMF12、濃度為2~5mgmL的Ⅳ型膠原酶、濃度為1~5mgmL的透明質(zhì)酸酶以及濃度為0.1~0.5mgmL的DNaseI;消化液II包括濃度為0.1~0.5mgmL的DNaseI,以及0.25%胰蛋白酶;3對消化后的細胞進行培養(yǎng)傳代,然后用攜帶neomycin抗性基因與SV40-LT基因的慢病毒感染傳代細胞,再篩選建立大熊貓永生化腎細胞系。

如需購買、轉讓、實施、許可或投資類似專利技術,可聯(lián)系本專利的申請人或?qū)@麢嗳?a target="_blank" rel="noopener noreferrer nofollow" >成都大熊貓繁育研究基地,其通訊地址為:610503 四川省成都市成華區(qū)熊貓大道1375號;或者聯(lián)系龍圖騰網(wǎng)官方客服,聯(lián)系龍圖騰網(wǎng)可撥打電話0551-65771310或微信搜索“龍圖騰網(wǎng)”。

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