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龍圖騰網恭喜頂探科技(北京)有限公司申請的專利一種利用哺乳動物胚胎培養液檢測小RNA的方法獲國家發明授權專利權，本發明授權專利權由國家知識產權局授予，授權公告號為：CN110317862B 。

龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-05-13發布的發明授權授權公告中獲悉：該發明授權的專利申請號/專利號為：201810265343.9，技術領域涉及：C12Q1/6869；該發明授權一種利用哺乳動物胚胎培養液檢測小RNA的方法是由王峙嶠;胡小明設計研發完成，并于2018-03-28向國家知識產權局提交的專利申請。

本一種利用哺乳動物胚胎培養液檢測小RNA的方法在說明書摘要公布了：本發明是一種提取檢測RNA的種類及表達量的方法，特別是提取檢測細胞的培養液中微量RNA的方法。多種細胞在培養過程中會向培養液中分泌微量的RNA分子，本方法是通過可能含有RNA的樣本特別是細胞的培養液中的RNA分子3’端與5’端加接頭，繼而進行反轉錄反應，再進行擴增，還可以利用二代測序的方法對擴增完的DNA產物進行分析，從而判斷細胞分泌到培養液中的RNA的種類及表達量的方法。本發明的提取擴增方法，可以結合測序等方法對RNA檢測，操作簡便，可在不破壞原細胞的情況下獲悉細胞中的RNA信息。

本發明授權一種利用哺乳動物胚胎培養液檢測小RNA的方法在權利要求書中公布了：1.一種非診斷和非治療性的提取檢測微量小分子RNA的方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟：1提供可能含有RNA的樣本，其中，所述樣本是細胞的培養液，所述細胞的培養液是受精卵在形成8細胞前或囊胚期前培養大于等于24小時的培養液，且所述細胞的培養液中的RNA包括miRNA，所述miRNA包括miR-372、miR-515、miR-603和miR-191，并且，所述細胞的培養液中的RNA還包括siRNA、piwiRNA、piRNA、snoRNA、scaRNA、sdRNA、tsRNA中的一種或多種；2加入裂解液和RNA消化酶抑制劑；3加入DNA消化酶消化樣本中的DNA；4加入核糖體RNA抑制引物，其中所述RNA抑制引物是5.8s核糖體RNA抑制引物，其序列為SEQIDNO：1或SEQIDNO：6；5加入3’接頭引物和RNA連接酶，使之連接于樣本中RNA的3’端，其中所述3’接頭引物的序列為SEQIDNO：2或SEQIDNO：7；6加入反轉錄引物；7加入5’接頭引物和RNA連接酶，使之連接于樣本中RNA的5’端，其中所述5’接頭引物的序列為SEQIDNO：9或SEQIDNO：10；8加入RNA消化酶抑制劑及反轉錄酶進行反轉錄；9加入RNA消化酶消化樣本中的RNA；10加入正向擴增引物和DNA聚合酶進行PCR擴增反應；11在步驟10反應結束后，加入反向擴增引物、正向擴增引物和DNA聚合酶進行二次PCR擴增反應。

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