恭喜通化東寶藥業股份有限公司郭常閏獲國家專利權
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龍圖騰網恭喜通化東寶藥業股份有限公司申請的專利德谷胰島素生物學活性的檢測方法及檢測試劑盒獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN114720703B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-05-13發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202210366450.7,技術領域涉及:G01N33/74;該發明授權德谷胰島素生物學活性的檢測方法及檢測試劑盒是由郭常閏;陳瑩瑩;彭媛媛;于秀梅設計研發完成,并于2022-04-08向國家知識產權局提交的專利申請。
本德谷胰島素生物學活性的檢測方法及檢測試劑盒在說明書摘要公布了:本發明涉及生物檢測領域,特別涉及德谷胰島素生物學活性的檢測方法及檢測試劑盒。本發明通過含有胰島素受體的細胞進行體外培養來檢定德谷胰島素生物活性,細胞培養后,加入制備好的不同濃度的待測樣品及標準品與細胞相互作用,加入含抑制劑裂解液對細胞進行裂解,裂解后將細胞裂解液轉移到已用抗體包被好的包被檢測板中,結合,加入PY?20報告抗體,再加入顯色液顯色,最后終止液終止反應,多功能酶標儀進行讀數。本發明提供的方法通過ELISA試劑盒來進行實驗,與現有技術的體外細胞及小鼠血糖試驗相比,不容易受到外源因素的影響,縮短了檢測時間,提高了實驗結果的準確度。
本發明授權德谷胰島素生物學活性的檢測方法及檢測試劑盒在權利要求書中公布了:1.德谷胰島素生物學活性的檢測方法,其特征在于,包括如下步驟:步驟A:取含有胰島素受體的細胞復蘇、傳代、鋪板、過夜培養;步驟B:取捕獲抗體經包被緩沖液稀釋后鋪板,封板后避光孵育過夜;步驟C:取標準品和供試品經系列梯度稀釋,分別轉至清洗后的步驟A獲得的細胞板,封板后孵育,再經裂解液裂解,獲得細胞裂解液;步驟D:取步驟B獲得的檢測板清洗后經封閉液封閉后培養、去除封閉液、清洗,轉入步驟C獲得的所述細胞裂解液,培養;步驟E:清洗后,加入報告抗體孵育;去除所述報告抗體,清洗,經顯色液顯色,避光孵育,再加入終止液,檢測,獲得EC50值;根據所述標準品EC50值、所述供試品EC50值、標準品標示比活、所述標準品的起始濃度和所述供試品的起始濃度,獲得所述德谷胰島素生物學活性;步驟A中所述鋪板的細胞密度為7.5×104個ml;步驟C中所述系列梯度稀釋為倍比稀釋,所述倍比稀釋的倍數為2倍;所述標準品或所述供試品的初始濃度為3000pmolml步驟C中所述孵育具體為:于37℃,5%CO2孵育30min±10min;步驟E獲得所述德谷胰島素生物學活性具體為:德谷胰島素生物活性(nmolmg)=標準品EC50供試品EC50×標準品標示比活×校正因子;其中,所述標準品標示比活為163.9nmolmg,校正因子=標準品起始濃度供試品起始濃度。
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