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龍圖騰網(wǎng)恭喜深圳大學(xué)申請的專利一種熒光發(fā)射比率超分辨成像方法獲國家發(fā)明授權(quán)專利權(quán)，本發(fā)明授權(quán)專利權(quán)由國家知識產(chǎn)權(quán)局授予，授權(quán)公告號為：CN115656129B 。

龍圖騰網(wǎng)通過國家知識產(chǎn)權(quán)局官網(wǎng)在2025-05-13發(fā)布的發(fā)明授權(quán)授權(quán)公告中獲悉：該發(fā)明授權(quán)的專利申請?zhí)?專利號為：202211340584.8，技術(shù)領(lǐng)域涉及：G01N21/64；該發(fā)明授權(quán)一種熒光發(fā)射比率超分辨成像方法是由陳越;郭嘉慶;李灝;王璐瑋;俞憲同;陳鈺;宋軍;屈軍樂設(shè)計(jì)研發(fā)完成，并于2022-10-29向國家知識產(chǎn)權(quán)局提交的專利申請。

本一種熒光發(fā)射比率超分辨成像方法在說明書摘要公布了：本發(fā)明提供了一種熒光發(fā)射比率超分辨成像方法，包括脈沖激光器，脈沖激光器發(fā)出的激光經(jīng)過半波片，再經(jīng)過格蘭激光棱鏡，經(jīng)過格蘭激光棱鏡其中一束激光傳向高速光電二極管探測器，另一束激光傳向第一分束器，分別照向第一反射鏡和螺旋相位板，經(jīng)過螺旋相位板的激光傳向第二反射鏡，經(jīng)過第二反射鏡后傳向角反射器，經(jīng)過第一反射鏡的激光傳向第二分束器，分別傳向角反射器和第三反射鏡，經(jīng)過第三反射器的激光依次通過雙色鏡、振鏡、掃描透鏡、管鏡和四分之一玻片后，通過物鏡聚焦后照射至載物臺的樣品上。本發(fā)明降低超分辨技術(shù)對熒光染料和樣品制備的要求，拓寬染料的選擇范圍，為低成本的活體超分辨成像研究提供技術(shù)支撐。

本發(fā)明授權(quán)一種熒光發(fā)射比率超分辨成像方法在權(quán)利要求書中公布了：1.一種熒光發(fā)射比率超分辨成像方法，其特征在于：包括脈沖激光器（1），所述脈沖激光器（1）發(fā)出的激光經(jīng)過半波片（2），再經(jīng)過格蘭激光棱鏡（3），經(jīng)過格蘭激光棱鏡（3）分成兩束激光，其中一束激光傳向高速光電二極管探測器（11），所述高速光電二極管探測器（11）連接有時間相關(guān)單光子計(jì)數(shù)器（12），所述時間相關(guān)單光子計(jì)數(shù)器（12）連接有計(jì)算機(jī)（13），另一束激光傳向第一分束器（4），經(jīng)過第一分束器（4）再次分成兩束激光，分別照向第一反射鏡（5）和螺旋相位板（6）；經(jīng)過螺旋相位板（6）的激光傳向第二反射鏡（9），經(jīng)過第二反射鏡（9）后傳向角反射器（10）；所述螺旋相位板（6）用于將激光的波前由高斯型轉(zhuǎn)換成環(huán)形，所述角反射器（10）通過延長或縮短環(huán)型激發(fā)光斑的光程在時間上控制高斯型激光和環(huán)形激光之間的脈沖間隔；經(jīng)過第一反射鏡（5）的激光傳向第二分束器（7），經(jīng)過第二分束器（7）再次分成兩束，分別傳向角反射器（10）和第三反射鏡（8）；經(jīng)過第三反射鏡（8）的激光依次通過雙色鏡（15）、振鏡（17）、掃描透鏡（18）、管鏡（19）和四分之一玻片（20）后，通過物鏡（21）聚焦后照射至載物臺（22）的樣品上；所述載物臺（22）的樣品被激發(fā)后產(chǎn)生熒光，熒光被物鏡（21）收集后經(jīng)四分之一玻片（20）、管鏡（19）、掃描透鏡（18）、振鏡（17）和雙色鏡（15），被雙色鏡（15）反射后經(jīng)過濾光片（16）到達(dá)光電倍增管（14），所述濾光片（16）用于去除熒光以外的雜散光，提高圖像信噪比，時間相關(guān)單光子計(jì)數(shù)器（12）同時接收高速光電二極管探測器（11）和光電倍增管（14）采集的參考信號和熒光信號，并將數(shù)據(jù)傳輸至計(jì)算機(jī)（13）進(jìn)行存儲和處理；首先，以環(huán)形激光脈沖所在的時間通道為界限將熒光信號分為兩部分，前半部分的熒光光子由高斯型激光激發(fā)，形成由高斯光斑點(diǎn)擴(kuò)展函數(shù)組成的高斯圖像，剩余部分的熒光光子由環(huán)形激光激發(fā)，形成由環(huán)形光斑點(diǎn)擴(kuò)展函數(shù)組成的環(huán)形圖像；然后對高斯圖像和環(huán)形圖像對應(yīng)坐標(biāo)的灰度值進(jìn)行判定，根據(jù)判定方案得到熒光發(fā)射比率納米顯微圖像各坐標(biāo)的灰度值，高斯圖像和環(huán)形圖像中各像素的灰度值分別由IGaussianx,y和IDountx,y表示；先判斷IGaussianx,y各個坐標(biāo)位置像素的灰度值是否為零，若IGaussianx,y=0，則IFERNx,y圖像中對應(yīng)坐標(biāo)像素的灰度值為0；若IGaussianx,y≠0，則判斷IDountx,y對應(yīng)坐標(biāo)位置像素的灰度值是否為零，此時若IDountx,y=0，則IFERNx,y圖像中對應(yīng)坐標(biāo)像素的灰度值與IGaussianx,y相同；若IDountx,y≠0，則IFERNx,y圖像中對應(yīng)坐標(biāo)像素的灰度值為IGaussianx,yIDountx,y，根據(jù)上述判定，最終得到熒光發(fā)射比率納米顯微圖像。

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