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恭喜南京啟真基因工程有限公司牛冬獲國家專利權

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龍圖騰網恭喜南京啟真基因工程有限公司申請的專利構建CRYGC基因突變的先天性白內障模型豬核移植供體細胞的基因編輯系統及其應用獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN115232836B

龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-05-06發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202110945790.0,技術領域涉及:C12N15/87;該發明授權構建CRYGC基因突變的先天性白內障模型豬核移植供體細胞的基因編輯系統及其應用是由牛冬;汪滔;陶裴裴;劉璐;曾為俊;王磊;程銳;趙澤英;馬翔;黃彩云;段星設計研發完成,并于2021-08-17向國家知識產權局提交的專利申請。

構建CRYGC基因突變的先天性白內障模型豬核移植供體細胞的基因編輯系統及其應用在說明書摘要公布了:本發明公開了構建CRYGC基因突變的先天性白內障模型豬核移植供體細胞的基因編輯系統及其應用。本發明提供了一種制備重組細胞的方法,包括如下步驟:將SEQIDNO:18所示CRYGC?gRNA1、SEQIDNO:19所示CRYGC?gRNA4和NCN蛋白共轉染豬細胞,得到重組細胞。本發明采用CRISPRCas9技術聯合雙gRNA編輯進行了CRYGC基因的敲除,模擬白內障的自然發病遺傳特征,并獲得了CRYGC基因敲除的單細胞克隆,為后期通過體細胞核移植動物克隆技術培育白內障模型豬奠定了基礎。本發明對于白內障藥物的研發及揭示該病的發病機制具有重大應用價值。

本發明授權構建CRYGC基因突變的先天性白內障模型豬核移植供體細胞的基因編輯系統及其應用在權利要求書中公布了:1.一種制備重組細胞的方法,包括如下步驟:將CRYGC-gRNA1、CRYGC-gRNA4和NCN蛋白共轉染豬細胞,得到重組細胞;所述CRYGC-gRNA1為sgRNA,其靶序列結合區如SEQIDNO:18中第3-22位核苷酸所示;所述CRYGC-gRNA4為sgRNA,其靶序列結合區如SEQIDNO:19中第3-22位核苷酸所示;所述NCN蛋白如SEQIDNO:3所示;所述NCN蛋白的制備方法包括如下步驟:1將質粒pKG-GE4導入大腸桿菌BL21DE3,得到重組菌;2采用液體培養基30℃培養所述重組菌,然后加入IPTG并25℃誘導培養,然后收集菌體;3將收集的菌體進行菌體破碎,收集粗蛋白溶液;4采用親和層析從所述粗蛋白溶液中純化具有His6標簽的融合蛋白;5采用具有His6標簽的腸激酶酶切具有His6標簽的融合蛋白,然后采用Ni-NTA樹脂去除具有His6標簽的蛋白,得到純化的NCN蛋白;質粒pKG-GE4如SEQIDNO:1所示。

如需購買、轉讓、實施、許可或投資類似專利技術,可聯系本專利的申請人或專利權人南京啟真基因工程有限公司,其通訊地址為:211306 江蘇省南京市高淳區經濟開發區花山路17號6幢南京健康產業研究院3樓;或者聯系龍圖騰網官方客服,聯系龍圖騰網可撥打電話0551-65771310或微信搜索“龍圖騰網”。

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