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龍圖騰網(wǎng)恭喜蘇州近岸蛋白質(zhì)科技股份有限公司申請的專利一種通用型檢測RNA甲基轉(zhuǎn)移酶活性的方法獲國家發(fā)明授權(quán)專利權(quán)，本發(fā)明授權(quán)專利權(quán)由國家知識產(chǎn)權(quán)局授予，授權(quán)公告號為：CN118667919B 。

龍圖騰網(wǎng)通過國家知識產(chǎn)權(quán)局官網(wǎng)在2025-05-02發(fā)布的發(fā)明授權(quán)授權(quán)公告中獲悉：該發(fā)明授權(quán)的專利申請?zhí)?專利號為：202411155626.X，技術(shù)領(lǐng)域涉及：C12Q1/48；該發(fā)明授權(quán)一種通用型檢測RNA甲基轉(zhuǎn)移酶活性的方法是由鄭紫君;吳亞會;鄭實;趙曼曼設(shè)計研發(fā)完成，并于2024-08-22向國家知識產(chǎn)權(quán)局提交的專利申請。

本一種通用型檢測RNA甲基轉(zhuǎn)移酶活性的方法在說明書摘要公布了：本發(fā)明提供了一種通用型檢測RNA甲基轉(zhuǎn)移酶活性的方法。具體地，本發(fā)明公開了一種檢測RNA甲基轉(zhuǎn)移酶活性的方法，包括以下步驟：提供長度為15?50nt的單鏈RNA分子作為反應(yīng)底物；對其分別進(jìn)行測試反應(yīng)。將測試酶根據(jù)結(jié)果直接代入計算即可得到酶活。此外，本發(fā)明的檢測方法可以簡單、快速、準(zhǔn)確地完成RNA甲基轉(zhuǎn)移酶的活性檢測。本發(fā)明方法的測定結(jié)果波動性小，重現(xiàn)性好。

本發(fā)明授權(quán)一種通用型檢測RNA甲基轉(zhuǎn)移酶活性的方法在權(quán)利要求書中公布了：1.一種檢測RNA甲基轉(zhuǎn)移酶活性的方法，其特征在于，包括以下步驟：（S1）提供長度為22nt的Cap0mRNA作為反應(yīng)底物；所述Cap0mRNA為核苷酸序列如SEQIDNO.3所示的單鏈RNA分子；（S2）對（S1）中的RNA分子分別進(jìn)行以下測試反應(yīng)，所述測試反應(yīng)包括在陰性測試體系、第一測試體系、第二測試體系反應(yīng)，反應(yīng)時間為t，其中：陰性測試體系中，不包含酶；第一測試體系中，包含RNA甲基轉(zhuǎn)移酶的標(biāo)準(zhǔn)品酶；第二測試體系中，包含待檢測的RNA甲基轉(zhuǎn)移酶；（S3）檢測所述陰性測試體系、第一測試體系、第二測試體系中的SAH的生成量，分別記為A0、A1、A2；（S4）基于針對所述SAH生成量A0、A1、A2的分析，獲得待檢測的RNA甲基轉(zhuǎn)移酶活性的檢測結(jié)果；所述陰性測試體系中SAH生成量為A0；第一測試體系中，當(dāng)RNA甲基轉(zhuǎn)移酶的標(biāo)準(zhǔn)品酶的酶量為C1時，SAH生成量為A1；第二測試體系中SAH生成量為A2；其中，A0表示質(zhì)控值，即陰性測試體系中SAH生成量；A1表示酶量為C1時RNA甲基轉(zhuǎn)移酶的標(biāo)準(zhǔn)品酶的SAH生成量；A2表示待檢測RNA甲基轉(zhuǎn)移酶的SAH生成量；如果A0=0，則認(rèn)為測試體系正常；A0＞0，則認(rèn)為測試失敗；如果以標(biāo)準(zhǔn)品酶的酶量為橫坐標(biāo)，SAH生成量為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，同時將縱坐標(biāo)截距校準(zhǔn)為0，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線y=ax，R2≥0.99，則認(rèn)為標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制成功；如果A2＞0，則認(rèn)為待檢測的RNA甲基轉(zhuǎn)移酶有酶活性，活性=A2a；如果A2=0，則認(rèn)為待檢測的RNA甲基轉(zhuǎn)移酶無活性;所述的檢測結(jié)果為定量結(jié)果；所述陰性測試體系與第一測試體系中的其他反應(yīng)條件完全相同，區(qū)別僅在于所述第一測試體系中包含RNA甲基轉(zhuǎn)移酶的標(biāo)準(zhǔn)品酶；所述第一測試體系與第二測試體系中的其他反應(yīng)條件完全相同，區(qū)別僅在于所述第二測試體系中包含待檢測的RNA甲基轉(zhuǎn)移酶；并且，在陰性測試體系、第一測試體系、第二測試體系中，各自獨立地包含SAM、10×加帽反應(yīng)緩沖液和RNase抑制劑；所述RNA的終濃度各自獨立地為150μg500μl-350μg500μl;所述SAM的終濃度為0.5mM-1.0mM，所述RNase抑制劑的終濃度為0.5Uμl-2Uμl；所述RNA甲基轉(zhuǎn)移酶標(biāo)準(zhǔn)品酶的終濃度為0.1Uμl-0.5Uμl;所述待檢測的RNA甲基轉(zhuǎn)移酶的終濃度為0.05mgml-0.2mgml;（S1）中，還包括：（S1.1）提供一目的基因的DNA；（S1.2）體外轉(zhuǎn)錄（S1.1）中的DNA，獲得由所述DNA轉(zhuǎn)錄的mRNA；（S1.3）DNA轉(zhuǎn)錄的mRNA，獲得加帽的Cap0mRNA。

如需購買、轉(zhuǎn)讓、實施、許可或投資類似專利技術(shù)，可聯(lián)系本專利的申請人或?qū)＠麢?quán)人蘇州近岸蛋白質(zhì)科技股份有限公司，其通訊地址為：215200 江蘇省蘇州市吳江經(jīng)濟(jì)開發(fā)區(qū)云創(chuàng)路228號3層,4層；或者聯(lián)系龍圖騰網(wǎng)官方客服，聯(lián)系龍圖騰網(wǎng)可撥打電話0551-65771310或微信搜索“龍圖騰網(wǎng)”。