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龍圖騰網恭喜青島科技大學申請的專利一種測定右旋糖酐酶活力的方法及其應用獲國家發明授權專利權，本發明授權專利權由國家知識產權局授予，授權公告號為：CN115992198B 。

龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-04-29發布的發明授權授權公告中獲悉：該發明授權的專利申請號/專利號為：202211420452.6，技術領域涉及：C12Q1/34；該發明授權一種測定右旋糖酐酶活力的方法及其應用是由張永勤;董靜文;陳相玉;鄔雅喃;劉銀春;劉建瑞;劉芳設計研發完成，并于2022-11-14向國家知識產權局提交的專利申請。

本一種測定右旋糖酐酶活力的方法及其應用在說明書摘要公布了：本發明屬于酶活力測定技術領域。針對現有的右旋糖酐酶活力測定技術存在的靈敏度低、標準曲線截距偏離坐標軸原點的問題，本發明公開一種測定右旋糖酐酶活力的方法及其應用，具體包括以下步驟：a.底物的精制；b.酶活力測定：制作用MBTH法測得的葡萄糖吸光度值與其相應濃度的標準對應關系曲線；用MBTH法檢測待測右旋糖酐酶水解右旋糖酐后產生的相當于葡萄糖的吸光度值；推算右旋糖酐酶的活力；c.牙膏以及漱口水中酶活力的測定。本發明的酶活力測定方法靈敏度高，所用葡萄糖標準曲線以及相應的酶濃度曲線的截距均接近于零，樣品的稀釋倍數不會影響酶活力測定的準確性。

本發明授權一種測定右旋糖酐酶活力的方法及其應用在權利要求書中公布了：1.一種測定右旋糖酐酶活力的方法，其特征在于，包括以下步驟：1精制底物：a.將右旋糖酐粉碎，制成右旋糖酐粉末；b.將右旋糖酐粉末分散于35％-70％的乙醇溶液中，充分攪拌，離心，棄去上清液，可重復該步驟數次，將右旋糖酐粉末中的小分子物質除去；c.采用濃度遞增的乙醇溶液對步驟b得到的沉淀進行逐級脫水，所采用的乙醇溶液的濃度為80％-100％；d.將丙酮加入到步驟c得到的沉淀中，超聲后靜置，在高真空度條件下減壓旋蒸，得到干燥的精制底物，所述的高真空度是指其壓力≤-0.089MPa；如果右旋糖酐的重均分子量≥70kDa且最小分子量大于10kDa，則可直接作為精制底物使用，省略上述精制步驟；2配制底物溶液及右旋糖酐酶溶液：將步驟1的精制底物加入到濃度為0.1-1molL強堿溶液中，充分混勻使其溶解，加入酸調pH至待測pH值，用待測pH值的緩沖溶液定容，從而得到底物溶液；用同一所述緩沖溶液配制右旋糖酐酶溶液；3繪制葡萄糖吸光度值與葡萄糖濃度的標準對應關系曲線：用步驟2配制的底物溶液，配制一系列濃度梯度的葡萄糖標準溶液，所述一系列濃度梯度的葡萄糖標準溶液中的底物的濃度相同，并且葡萄糖濃度范圍在0-0.5mmolL；向所述一系列濃度梯度的葡萄糖標準溶液中加入堿性試劑得到堿性葡萄糖標準溶液，所述堿性葡萄糖標準溶液中的堿性試劑的濃度相同，加入新鮮配制的MBTH試劑，體系中OH-濃度在0.02-0.2molL范圍內，MBTH的初始濃度范圍為0.3-4.5mmolL，DTT的初始濃度范圍為0-1.6mmolL，在50-100℃條件下反應5-180min，再加入酸性鐵試劑，反應體系變成酸性，體系中其H+濃度為0.02-0.3molL，Fe3+的初始濃度范圍為1-6mmolL，發生顯色反應，顯色穩定后在580-680nm波長下測定吸光度值，根據每組葡萄糖濃度與測得的吸光度值之間的關系繪制標準對應關系曲線；所述的MBTH試劑是由MBTH和DTT配制而成的水溶液，或者只由MBTH配制而成的水溶液；所述的酸性鐵試劑是由可溶性Fe3+鹽和強酸配制而成的水溶液；4右旋糖酐酶的酶解反應：向右旋糖酐酶溶液中加入步驟2配制的底物溶液，保證所得溶液中底物的濃度與步驟2葡萄糖標準溶液中底物的濃度相同，然后進行酶解反應，再加入堿性試劑，終止酶解反應，得到堿性酶解液，所述堿性酶解液中堿性試劑的濃度與步驟2堿性葡萄糖標準溶液中堿性試劑的濃度相同；5制備堿性酶解空白溶液；6測定堿性酶解液和堿性酶解空白溶液：參照步驟3的方法進行MBTH反應，測定步驟4得到的堿性酶解液和步驟5得到的堿性酶解空白溶液的吸光度值，從而獲得酶解產生的還原端基濃度，進而得到右旋糖酐酶活力。

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