恭喜寧波大學胡宇芳獲國家專利權
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龍圖騰網(wǎng)恭喜寧波大學申請的專利基于“Cu(II)to Cu(II)”機理的組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶電化學傳感器的制備及應用獲國家發(fā)明授權專利權,本發(fā)明授權專利權由國家知識產(chǎn)權局授予,授權公告號為:CN116087308B 。
龍圖騰網(wǎng)通過國家知識產(chǎn)權局官網(wǎng)在2025-04-29發(fā)布的發(fā)明授權授權公告中獲悉:該發(fā)明授權的專利申請?zhí)?專利號為:202211661666.2,技術領域涉及:G01N27/48;該發(fā)明授權基于“Cu(II)to Cu(II)”機理的組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶電化學傳感器的制備及應用是由胡宇芳;劉佳月;盧彥美設計研發(fā)完成,并于2022-11-15向國家知識產(chǎn)權局提交的專利申請。
本基于“Cu(II)to Cu(II)”機理的組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶電化學傳感器的制備及應用在說明書摘要公布了:本發(fā)明是一種基于“CuIItoCuII”機理的組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶電化學傳感器的制備及應用,首先CoA中的巰基與CuII原位產(chǎn)生CoA?CuII復合物,可以視作具有多個腺嘌呤作為側(cè)基的納米鏈狀復合物,該復合物可以通過其腺嘌呤側(cè)基與GO通過π?π共軛效應結(jié)合,從而結(jié)合固定在電極表面,利用FSCV技術采集CuII的電壓信號,因為CoA與CuII的聚合作用可實現(xiàn)CoA的電化學傳感分析,又因為CoA是HAT催化反應的產(chǎn)物可實現(xiàn)HAT的電化學傳感分析,改變CoA或是HAT濃度,可以獲得一系列不同濃度CoA與HAT對應的FSCV信號大小;加入抑制劑漆樹酸C646時,HAT活性被抑制,無法生成CoA,使得復合物無法形成,從而實現(xiàn)HAT抑制劑的篩選。基于此構(gòu)建了一種快速、簡單、可靠穩(wěn)定、靈敏度高的FSCV分析方法。
本發(fā)明授權基于“Cu(II)to Cu(II)”機理的組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶電化學傳感器的制備及應用在權利要求書中公布了:1.一種基于“CuIItoCuII”機理的組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶電化學傳感器的用途,其特征在于,應用于CoA和HAT活性檢測及其抑制劑的篩選,具體步驟如下:1CoA-CuII復合物的制備依次取1~10μL終濃度為50~500μM的CuNO32溶液,1~20μL終濃度為0.01~150μMCoA溶液,與100mMpH7.0的PBS緩沖溶液配成0.1~1mL的溶液,將溶液劇烈振蕩5~15min,即得到CoA-CuII復合物;2電化學生物傳感器的制備a.GCE:將玻碳電極在麂皮上依次用1、0.3和0.05μm的三氧化二鋁粉末拋光打磨1~5min,之后再依次用水、乙醇超聲洗滌1~5min,然后用氮氣吹干備用,該電極標記為GCE;b.GOGCE:將4.0~8.0mg石墨烯分散于2.0~10.0mL濃度為0.1~0.3M的pH5.0~6.0的醋酸緩沖溶液,于超聲清洗器中超聲分散2~5h,得到石墨烯分散液;利用循環(huán)伏安法,電位范圍為-2~2V,掃速為10mVs,重復掃描10~20圈,將上述石墨烯電沉積到GCE得到石墨烯修飾玻碳電極,標注為GOGCE;c.CoA-CuIIGOGCE:取5.0~10μL步驟1中合成的CoA-CuII復合物滴加在GOGCE表面,于室溫靜置0.1~1.0h,用PBS緩沖溶液緩緩沖洗電極以去除過量的復合物,該電極標記為CoA-CuIIGOGCE;利用電化學快速掃描循環(huán)伏安法FSCV進行掃描,設置初始電位為-1.5~-0.3V,終止電位為-0.2~0.4V,掃描速度10~400Vs,使用PBS緩沖溶液作為電解質(zhì)溶液,實現(xiàn)對CoA和HAT活性檢測及其抑制劑的篩選。
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