恭喜北京達爾文細胞生物科技有限公司王宇獲國家專利權
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龍圖騰網恭喜北京達爾文細胞生物科技有限公司申請的專利一種關節修復蛋白組合物及其制備方法和其應用獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN116555174B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-04-29發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202310042910.5,技術領域涉及:C12N5/0775;該發明授權一種關節修復蛋白組合物及其制備方法和其應用是由王宇;高文勇;陳琳;李建軍設計研發完成,并于2023-01-28向國家知識產權局提交的專利申請。
本一種關節修復蛋白組合物及其制備方法和其應用在說明書摘要公布了:本發明涉及一種關節修復功效蛋白組合物,其制備包括如下步驟:在細胞蛋白提取物中加入20UmL?35UmL的核酸酶或全能核酸酶的任一種或其組合,將其置于37℃±1℃條件下酶解15min?40min,將制得的酶解液分離純化,即得。本發明所得的細胞蛋白組合物具有細胞修復、關節修復、軟骨修復的效果,用于防治關節外傷性病變、退變性骨關節病變、關節損傷、難愈性創面病變、膝關節骨性關節病變、軟骨損傷的任一種或其并發癥。
本發明授權一種關節修復蛋白組合物及其制備方法和其應用在權利要求書中公布了:1.一種關節修復蛋白組合物,其制備包括下述步驟:(1)在細胞蛋白提取物中加入20UmL-35UmL的核酸酶,將其置于37℃±1℃條件下酶解15min-40min,制得酶解液,將其置于2℃-4℃條件下備用;(2)在2℃-8℃條件下,將步驟(1)制得的酶解液用洗脫溶劑配置成5-15mgml后,過色譜柱,洗脫流速為0.1-1mlmin,監測并收集紫外波長為280nm的洗脫部位,即得,其中,洗脫溶劑由50mmolL磷酸鹽緩沖液pH6.8中含300mmolL氯化鈉組成;所述細胞蛋白提取物的制備包括如下步驟:S-1:將密度為5.0×106個mL-1.0×107個mL的間充質傳代細胞置于含有DMEMF1240-50%、RPMI164040-50%、牛血清蛋白(BSA)0.1-2%、表皮細胞生長因子(EGF)1-15ugmL、成纖維細胞生長因子(FGF)1-15ugmL、胰島素轉鐵蛋白1-15ugmL、復方氨基酸18AA0.01-0.1%和2-10μmolL應激物的培養基中,再將其置于37.0℃±0.5℃、5%±1.0%CO2條件下培養10h-14h后,分離,洗滌,收集細胞,其中,所述的應激物選自化合物16: ;S-2:將收集細胞按照密度為5.0×106個mL-1.0×107個mL分散于溶劑中,再將其置于2℃-8℃下超聲處理,制得細胞裂解液,其中,所述溶劑選自選自生理鹽水、5%葡萄糖溶液、磷酸鹽緩沖液、TBPS緩沖液、TBST緩沖液、Tris緩沖液的任一種或其組合;S-3:將步驟S-2制得的細胞裂解液分離后,所得的分離液依次經0.45um、0.22um濾膜過濾,即得;所述間充質傳代干細胞來源于臍帶。
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