恭喜南京林業大學鄭兆娟獲國家專利權
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龍圖騰網恭喜南京林業大學申請的專利一種提高霍氏假單胞菌5-羥甲基糠醛氧化能力的培養方法獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN116004471B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-04-29發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202310086780.5,技術領域涉及:C12N1/20;該發明授權一種提高霍氏假單胞菌5-羥甲基糠醛氧化能力的培養方法是由鄭兆娟;劉青;劉鵬;金小虎;歐陽嘉設計研發完成,并于2023-02-09向國家知識產權局提交的專利申請。
本一種提高霍氏假單胞菌5-羥甲基糠醛氧化能力的培養方法在說明書摘要公布了:本發明公開了一種提高霍氏假單胞菌5?羥甲基糠醛氧化能力的培養方法。以有機酸酸解石花菜獲得石花菜水解液,順序添加氧化鈣和氫氧化鈉調節水解液pH,離心后所得清液為培養基碳源,在此基礎上添加少量廉價有機氮源及無機鹽,制得石花菜酸解液培養基。該培養基成本低廉,以該培養基培養霍氏假單胞菌,所得細胞氧化5?羥甲基糠醛的催化能力高于用昂貴碳源和氮源培養基培養的細胞。
本發明授權一種提高霍氏假單胞菌5-羥甲基糠醛氧化能力的培養方法在權利要求書中公布了:1.一種提高霍氏假單胞菌5-羥甲基糠醛氧化能力的培養方法,其特征在于,包括如下步驟:(1)將石花菜粉碎后與有機酸溶液混合,高溫反應,反應結束后固液分離得到石花菜酸解液;(2)調節步驟(1)得到的石花菜酸解液的pH至中性,以調節pH后的石花菜酸解液為碳源,復配有機氮源和無機鹽,制備得到石花菜酸解液培養基;(3)將霍氏假單胞菌接入GMM培養基中,培養得到活化液;將活化液轉接至步驟(2)制備的石花菜酸解液培養基中進一步擴大培養,收集細胞并用生理鹽水清洗,經固液分離得到生物催化劑;(4)以步驟(3)制得的生物催化劑催化5-羥甲基糠醛,催化反應結束后,固液分離收集上清液,得到5-羥甲基-2-呋喃甲酸;其中,步驟(2)中,所述的石花菜酸解液培養基,其配方為,1L蒸餾水中含:pH調節后的石花菜酸解液50~200mL、有機氮源2~5g、Na2HPO40.5~3g、KH2PO40.2~1.5g、NH4Cl0~0.5g、NaCl0~0.25g、MgSO40~0.2g、0~2mL微量元素溶液,溶劑為水,pH6.0~7.5;其中,步驟(2)中,所述調節步驟(1)得到的石花菜酸解液的pH至中性,所用的中和劑為氧化鈣和氫氧化鈉,兩種中和劑按順序依次添加;其中,步驟(2)中,所述的有機氮源為玉米漿干粉、花生餅粉、黃豆餅粉中的任意一種或幾種的組合;其中,步驟(3)中,所述的霍氏假單胞菌為霍氏假單胞菌NL2019,其保藏編號為CCTCCNO:M2021356;其中,步驟(4)中,以步驟(3)制得的生物催化劑催化5-羥甲基糠醛,其中所述的生物催化劑,其干重濃度為5~10gL;所述的5-羥甲基糠醛,其濃度為2~40gL;其中,步驟(4)中,所述的催化反應,其反應條件為:反應溫度為25℃~45℃,反應pH為5.5~8.0,反應時間為0.5~10小時。
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