恭喜內蒙古農業大學劉大程獲國家專利權
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龍圖騰網恭喜內蒙古農業大學申請的專利一種測定酵母培養物中N-乙酰谷氨酸含量的方法獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN119375408B 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-03-25發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202411958213.5,技術領域涉及:G01N30/88;該發明授權一種測定酵母培養物中N-乙酰谷氨酸含量的方法是由劉大程;張小潔;徐子萱;楊嵐;金山設計研發完成,并于2024-12-30向國家知識產權局提交的專利申請。
本一種測定酵母培養物中N-乙酰谷氨酸含量的方法在說明書摘要公布了:本發明公開了一種測定酵母培養物中N?乙酰谷氨酸含量的方法,屬于化學分析技術領域,方法包括:預處理;提取;凈化;標準曲線的繪制和測定,計算出待測酵母培養物樣品中N?乙酰谷氨酸的含量。本發明采用高效液相色譜?紫外檢測器對酵母培養物中N?乙酰谷氨酸含量進行測定,適用于大多數飼料企業實驗室使用,能準確測定酵母培養物中N?乙酰谷氨酸含量,以期為進一步開發、制備酵母培養物提供參考,亦為下一步研究N?乙酰谷氨酸在動物機體中的作用機制做鋪墊,對于闡明酵母培養物的營養與保健作用機制具有重要意義。
本發明授權一種測定酵母培養物中N-乙酰谷氨酸含量的方法在權利要求書中公布了:1.一種測定酵母培養物中N-乙酰谷氨酸含量的方法,其特征在于,包括以下步驟:1預處理:將待測酵母培養物樣品粉碎后過篩,備用;2提取:將甲醇分成兩部分,將預處理后的待測樣品和第一部分甲醇混合加熱超聲提取,每隔一段時間振蕩混勻一次,將提取后的溶液進行離心,得到上清液,將離心后的殘渣加入第二部分甲醇渦旋振蕩混勻,將混合物離心,合并上清液轉移至容量瓶中,合并的上清液恢復至室溫后,加入氨水調節pH≥6.5,用甲醇定容,得到提取液;3凈化:依次用5mL甲醇和5mL水活化固相萃取小柱,取2mL步驟2得到的提取液以流速小于1mLmin緩慢通過固相萃取小柱,用3mL體積分數為5%的氨水淋洗,抽至近干,再用3mL甲醇清洗,最后用6mL甲酸的體積分數為2%的甲酸甲醇溶液洗脫,收集洗脫液65℃水浴,待溶液蒸干后,加入2mL超純水復溶,經0.22μm濾膜過濾,得到供試品溶液;所述固相萃取小柱為AMICROMMAX,規格:60mg3mL;4標準曲線的繪制和測定:將N-乙酰谷氨酸標準品加入超純水溶解,配制成1mgmL的標準儲備液,將標準儲備液稀釋成濃度分別為1、5、10、25、50、100、250、500μgmL的標準系列工作液;將標準系列工作液和供試品溶液分別采用高效液相色譜儀進行測定,高效液相色譜條件為:色譜柱:AcclaimC30;流動相:磷酸的體積分數為0.05%的磷酸水溶液和甲醇的體積比為95:5的混合溶液;流速:1.0mLmin;柱溫:35℃;檢測器:紫外檢測器;檢測波長:215nm;進樣量:10μL;對標準系列工作液的目標峰進行分析得到色譜峰面積,以標準系列工作液濃度為橫坐標,以標準系列工作液的色譜峰面積為縱坐標,繪制標準曲線,獲得到線性回歸方程,對供試品溶液目標峰進行分析得到色譜峰面積,通過線性回歸方程,計算出待測酵母培養物樣品中N-乙酰谷氨酸的含量。
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