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龍圖騰網(wǎng)恭喜中國(guó)科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所申請(qǐng)的專(zhuān)利一種工程菌的構(gòu)建方法及其應(yīng)用獲國(guó)家發(fā)明授權(quán)專(zhuān)利權(quán)，本發(fā)明授權(quán)專(zhuān)利權(quán)由國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局授予，授權(quán)公告號(hào)為：CN116262929B 。

龍圖騰網(wǎng)通過(guò)國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局官網(wǎng)在2025-03-21發(fā)布的發(fā)明授權(quán)授權(quán)公告中獲悉：該發(fā)明授權(quán)的專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?專(zhuān)利號(hào)為：202111539688.7，技術(shù)領(lǐng)域涉及：C12N15/81；該發(fā)明授權(quán)一種工程菌的構(gòu)建方法及其應(yīng)用是由周雍進(jìn);曹選設(shè)計(jì)研發(fā)完成，并于2021-12-15向國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局提交的專(zhuān)利申請(qǐng)。

本一種工程菌的構(gòu)建方法及其應(yīng)用在說(shuō)明書(shū)摘要公布了：本申請(qǐng)公開(kāi)一種工程菌的構(gòu)建方法及其應(yīng)用。所述構(gòu)建方法包括以下步驟：在宿主菌株中導(dǎo)入DNA片段I，得到所述工程菌；所述DNA片段I從上游到下依次包括：?jiǎn)?dòng)子、融合基因、終止子；所述融合基因從上游到下依次包括：TPS基因、連接肽I的編碼基因、LPPS基因；所述宿主菌株選自釀酒酵母中的任一種。所述構(gòu)建方法優(yōu)化了宿主菌株的香紫蘇醇合成酶，有利于提高香紫蘇醇的產(chǎn)率。

本發(fā)明授權(quán)一種工程菌的構(gòu)建方法及其應(yīng)用在權(quán)利要求書(shū)中公布了：1.一種工程菌的構(gòu)建方法，其特征在于，所述構(gòu)建方法包括以下步驟：在宿主菌株中導(dǎo)入DNA片段I，得到所述工程菌；所述DNA片段I從上游到下依次包括：?jiǎn)?dòng)子、融合基因、終止子；所述宿主菌株為CEN.PK113-11C菌株；所述融合基因從上游到下依次包括： MBP基因、連接肽II的編碼基因、TPS基因、連接肽I的編碼基因、LPPS基因；所述LPPS基因的核苷酸序列如SEQIDNO：1所示；所述TPS基因的核苷酸序列如SEQIDNO：2所示；所述MBP基因的核苷酸序列如SEQIDNO：3所示；所述連接肽I的編碼基因的核苷酸序列如SEQIDNO：6所示；所述連接肽II的編碼基因的核苷酸序列如SEQIDNO：7所示；所述啟動(dòng)子選自PeTDH3、PGAL7中的任意一種；所述終止子選自TPYX212、TADH1中的任意一種；所述在宿主菌株中導(dǎo)入DNA片段I為將DNA片段I整合到宿主的XI-3基因位點(diǎn)；所述構(gòu)建方法還包括優(yōu)化MVA的合成途徑，包括（a）~（h）：（a）敲除宿主菌株的GAL80基因；（b）將含有FAA4-TAHD1-PTHD3-tHMG1的DNA片段整合到宿主菌株的FAA4基因位點(diǎn)；（c）將含有POX1-TTDH2-PtHXT7-SpHMGR的DNA片段整合到宿主菌株的POX1基因位點(diǎn)；SpHMGR來(lái)源于SilicibacterpomeroyiNADH依賴型SpHMGR；（d）將宿主菌株基因組上ERG20基因突變?yōu)镋RG20F96C基因；（e）將含有TENO2-HMG2K6R-PGAL10-1-ERG10-TPYK1的DNA片段整合到宿主菌株的XII-2基因位點(diǎn)；（f）將含有TPDC1-HMG2K6R-PGAL10-1-HMG2K6R-TENO2的DNA片段整合到宿主菌株的XII-3基因位點(diǎn)；（g）將宿主菌株中ERG9基因的啟動(dòng)子替換為PHXT1；（h）將含有PGAL7-BTS1-PaGGPPS-TTDH2的DNA片段整合到宿主菌株的XI-2基因位點(diǎn)；BTS1-PaGGPPS來(lái)自Phomopsisamygdali的GGPP合成酶融合蛋白基因BTS1-PaGGPPS；所述（a）~（h）不分先后順序，得到工程菌CXM17；所述（a）~（h）中，基因來(lái)源如下： 所述SpHMGR基因的核苷酸序列如SEQIDNO：5所示；所述BTS1-PaGGPPS基因的核苷酸序列如SEQIDNO：4所示；所述構(gòu)建方法還包括在工程菌CXM17的基礎(chǔ)上進(jìn)行優(yōu)化中心代謝途徑，包括（A）~（N）：（A）將含有HIS3-PTPI1-MmACL-TFBA1-PTDH3-RtME-TCYC1-PtHXT7-’MDH3-TTDH2-PPGK1-CTP1-TADH1的DNA片段整合到工程菌CXM17的HIS3基因位點(diǎn)；（B）將工程菌CXM17的PYC1基因的啟動(dòng)子PPYC1替換為啟動(dòng)子PTEF1；（C）將含有PtHXT7-MPC3-TDIT1-TMPC1-MPC1-PTPI1的DNA片段整合到工程菌CXM17的XI-4位點(diǎn)；（D）將含有TCYC1-AnACLa-PGAL1-PGAL10-AnACLb-TADH1的DNA片段整合到工程菌CXM17的X2位點(diǎn)；（E）將含有PTPI1-RtCIT1-TFBA1-TCYC1-IDP2-PTHD3-PTEF1-YHM2的DNA片段整合到工程菌CXM17的GAL1、GAL7、GAL10位點(diǎn)；（F）將含有PCOX9-TCYC1-GND1-PTHD3-PtHXT7-TKL1-TTDH2-TADH1-TAL1-PPGK1-PTEF1-ZWF1-TZWF1的DNA片段整合到工程菌CXM17的PGI1位點(diǎn)；（G）將工程菌CXM17的IDH2基因的啟動(dòng)子替換為啟動(dòng)子PGSY1；所述（A）~（G）不分先后順序，得到工程菌SCX38；所述（A）~（G）中，基因來(lái)源如下：

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