買專利賣專利找龍圖騰，真高效！ 查專利查商標用IPTOP,全免費！專利年費監控用IP管家,真方便！

龍圖騰網獲悉鄭州思昆生物工程有限公司申請的專利一種固定化模板多核苷酸配對末端測序方法獲國家發明授權專利權，本發明授權專利權由國家知識產權局授予，授權公告號為：CN115029424B 。

龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-05-16發布的發明授權授權公告中獲悉：該發明授權的專利申請號/專利號為：202110234085.X，技術領域涉及：C12Q1/6869；該發明授權一種固定化模板多核苷酸配對末端測序方法是由王亞文;王玲玲;孫潔設計研發完成，并于2021-03-03向國家知識產權局提交的專利申請。

本一種固定化模板多核苷酸配對末端測序方法在說明書摘要公布了：本發明涉及基因測序技術領域，具體涉及一種固定化模板多核苷酸配對末端測序方法。本發明方法中第一端測序模板鏈固定化在芯片上，通過將第一端測序模板鏈的互補鏈直接連接在其3’端的方式，將互補鏈間接固定在芯片上，解除第一端測序模板鏈與互補鏈之間的雙鏈結構，通過封堵第一端測序模板鏈的方式，避免互補鏈在復性環境與第一端測序模板鏈再雜交結合，進而實現以互補鏈為模板進行第二端測序。整個測序方法的第二端測序的模板鏈直接連接在第一端測序模板鏈的位置，克服了傳統雙末端測序方法第二端測序重新成簇造成的簇有序性降低、簇范圍變大等導致的測序信號穩定性差等技術缺陷。

本發明授權一種固定化模板多核苷酸配對末端測序方法在權利要求書中公布了：1.一種固定化多核苷酸模板配對末端測序方法，其特征在于，包括以下操作步驟：S1、提供固定在固體支持物上的陣列的單鏈模板多核苷酸，作為第一端測序模板鏈，加入第一測序引物，對單鏈模板多核苷酸至少部分序列進行測序，獲得第一測序引物的延伸鏈和對應的第一末端序列信息；S2：以第一端測序模板鏈為模板，形成與第一端測序模板鏈全長互補的多核苷酸鏈，稱為互補鏈；S3：將第一端測序模板鏈的3’端與互補鏈的5’端連接，解除第一端測序模板鏈和互補鏈的雙鏈雜交結構，并封閉第一端測序模板鏈，阻止復性環境下互補鏈與第一端測序模板鏈重新雜交；S4：加入與互補鏈的3’端互補配對的第二測序引物，對互補鏈的至少部分序列進行測序，獲得第二末端序列信息；步驟S2中形成互補鏈的具體方法為，第一測序引物的延伸鏈與第一端測序模板鏈解除雙鏈結構，去除第一測序引物的延伸鏈，加入至少部分與第一端測序模板鏈的3’端互補的擴增引物，以第一端測序模板鏈為模板，延伸擴增引物形成與第一端測序模板鏈全長互補的多核苷酸鏈作為互補鏈；擴增引物為莖環結構，擴增引物的3’莖部分具有凸出的單鏈區域，至少部分的凸出的單鏈區域與第一端測序模板鏈的3’端互補配對；步驟S3中第一端測序模板鏈的3’端與互補鏈的5’端連接的方法為：加入連接酶將擴增引物5’端與第一端測序模板鏈的3’端連接；步驟S3中解除第一端測序模板鏈和互補鏈的雙鏈雜交結構，并封閉第一端測序模板鏈的方法為：在變性條件下，第一端測序模板鏈和互補鏈解除雙鏈雜交結構，形成長單鏈，之后加入僅與長單鏈的第一端測序模板鏈的3’端互補配對的第一延伸引物，第一延伸引物以第一端測序模板鏈為模板延伸形成與第一端測序模板鏈互補雜交的第一延伸引物鏈，封閉第一端測序模板鏈。

如需購買、轉讓、實施、許可或投資類似專利技術，可聯系本專利的申請人或專利權人鄭州思昆生物工程有限公司，其通訊地址為：450001 河南省鄭州市自貿試驗區鄭州片區(經開)經開第六大街133號1號廠房3號樓6層；或者聯系龍圖騰網官方客服，聯系龍圖騰網可撥打電話0551-65771310或微信搜索“龍圖騰網”。