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龍圖騰網恭喜云南省熱帶作物科學研究所申請的專利一種澳洲堅果花粉管生長行為觀測方法獲國家發明授權專利權，本發明授權專利權由國家知識產權局授予，授權公告號為：CN115014903B 。

龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-05-16發布的發明授權授權公告中獲悉：該發明授權的專利申請號/專利號為：202210758660.0，技術領域涉及：G01N1/28；該發明授權一種澳洲堅果花粉管生長行為觀測方法是由孔廣紅;余文才;柳覲;賀熙勇;倪書邦設計研發完成，并于2022-06-30向國家知識產權局提交的專利申請。

本一種澳洲堅果花粉管生長行為觀測方法在說明書摘要公布了：本發明涉及生物技術領域，尤其涉及一種澳洲堅果花粉管生長行為觀測方法。具體包括如下步驟：1將授粉后的雌蕊浸沒于固定液中固定；2將雌蕊浸泡于酒精溶液中，然后洗滌；3將雌蕊與NaOH溶液混合軟化、洗滌、吸干水分；4將雌蕊浸泡在磷酸緩沖液中；5將雌蕊于中間位置進行橫切，使雌蕊上半部柱頭與下半部子房分開，然后再縱切成兩半，再次放入磷酸緩沖液中浸泡；6將雌蕊吸干水分后用染色劑染色、鏡檢。本發明的熒光顯微方法極大地弱化了雌蕊自身組織發光的現象，容易獲得花粉管在雌蕊內生長的高清晰度影像，對花粉管生長行為的呈現效果非常理想，可用于澳洲堅果品種間雜交親和性評價，實際應用價值高。

本發明授權一種澳洲堅果花粉管生長行為觀測方法在權利要求書中公布了：1.一種澳洲堅果花粉管生長行為觀測方法，其特征在于，包括如下步驟：（1）將授粉后的雌蕊浸沒于固定液中固定；（2）將步驟（1）得到雌蕊浸泡于酒精溶液中，然后洗滌獲得洗滌后的雌蕊；（3）將步驟（2）得到洗滌后的雌蕊與NaOH溶液混合軟化、洗滌、吸干水分；（4）將步驟（3）得到雌蕊浸泡在磷酸緩沖液中；（5）將步驟（4）得到雌蕊于中間位置進行橫切，使雌蕊上半部柱頭與下半部子房分開，然后再縱切成兩半，再次放入磷酸緩沖液中浸泡；（6）將步驟（5）得到雌蕊吸干水分后用染色劑染色、鏡檢；所述步驟（3）不同授粉時期的雌蕊軟化時間不同，雌蕊授粉后1～3d，軟化時間為2h；雌蕊授粉后4～7d，軟化時間為3h；雌蕊授粉后8～12d，軟化時間為4h；步驟（1）所述固定液包括酒精溶液、冰醋酸和甲醛；所述酒精溶液、冰醋酸和甲醛的體積比為84～94：4～8：3～7；所述酒精溶液的體積分數為55～65％；步驟（1）所述固定液與雌蕊的體積比為15～25:1；所述固定的時間為42～54h；步驟（3）所述的NaOH溶液的濃度為1.5～2.5molL；所述NaOH溶液和雌蕊的體積比為35～45:1；步驟（2）依次使用體積分數為55~65%、35~45%、15~25%的酒精溶液浸泡雌蕊；雌蕊在每一種濃度的酒精溶液的浸泡時間獨立為8～12min。

如需購買、轉讓、實施、許可或投資類似專利技術，可聯系本專利的申請人或專利權人云南省熱帶作物科學研究所，其通訊地址為：666100 云南省西雙版納傣族自治州景洪市宣慰大道99號熱作所農業研究中心6樓；或者聯系龍圖騰網官方客服，聯系龍圖騰網可撥打電話0551-65771310或微信搜索“龍圖騰網”。