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龍圖騰網恭喜內蒙古農業大學申請的專利一種測定酵母培養物中酵母β-葡聚糖含量的方法獲國家發明授權專利權，本發明授權專利權由國家知識產權局授予，授權公告號為：CN119574753B 。

龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-05-02發布的發明授權授權公告中獲悉：該發明授權的專利申請號/專利號為：202510138623.3，技術領域涉及：G01N30/02；該發明授權一種測定酵母培養物中酵母β-葡聚糖含量的方法是由劉大程;張小潔;徐子萱;云梓辰;劉世雄設計研發完成，并于2025-02-08向國家知識產權局提交的專利申請。

本一種測定酵母培養物中酵母β-葡聚糖含量的方法在說明書摘要公布了：本發明公開了一種測定酵母培養物中酵母β?葡聚糖含量的方法，屬于化學分析技術領域，方法包括：預處理；總葡聚糖水解；α?葡聚糖水解；谷物β?葡聚糖水解；衍生化反應；標準曲線的繪制和測定。本發明方法具有高精密度、良好的重復性和可行性，對酵母培養物中酵母β?葡聚糖含量的準確檢測具有參考價值。本發明方法將為酵母培養物的進一步開發和制備提供參考，并為相關領域的發展提供更多有價值的科學依據。通過這種方法，我們可以更準確地評估酵母培養物中酵母β?葡聚糖的含量，從而確保產品質量的準確性。

本發明授權一種測定酵母培養物中酵母β-葡聚糖含量的方法在權利要求書中公布了：1.一種測定酵母培養物中酵母β-葡聚糖含量的方法，其特征在于，包括以下步驟：1預處理：將待測酵母培養物樣品、已知純度的酵母β-葡聚糖對照品和已知純度的谷物β-葡聚糖對照品粉碎后過篩，備用；2總葡聚糖水解：稱取預處理后的待測樣品和已知純度的酵母β-葡聚糖對照品，分別加入硫酸水溶液后進行冰水浴，然后加入超純水進行沸水浴，再用乙酸鈉緩沖液轉移沸水浴后的溶液至容量瓶中，再然后向容量瓶中加入氫氧化鈉水溶液進行中和，最后用乙酸鈉緩沖液定容，取水解后的溶液進行離心，收集上清液至離心管中，向離心管中加入外切-1，3-β-葡聚糖酶與β-葡萄糖苷酶的混懸液后進行水浴加熱，得到樣品溶液A和對照品溶液A；α-葡聚糖水解：稱取預處理后的待測樣品和已知純度的酵母β-葡聚糖對照品，分別加入氫氧化鈉水溶液后進行冰水浴，同時磁力攪拌，隨后加入乙酸鈉緩沖液混合，再加入淀粉葡糖苷酶與蔗糖酶的混懸液和海藻糖酶混懸液進行水浴加熱，最后用超純水轉移水浴加熱后的溶液至容量瓶中并定容，取水解后的溶液進行離心，收集上清液至離心管中，得到樣品溶液B和對照品溶液B；谷物β-葡聚糖水解：稱取預處理后的待測樣品和已知純度的谷物β-葡聚糖對照品，分別加入乙醇水溶液和磷酸鈉緩沖液后進行沸水浴，然后進行水浴加熱，再加入內切-1,3-1,4-β-葡聚糖水解酶的混懸液，繼續水浴加熱，最后用乙酸鈉緩沖液轉移水浴加熱后的溶液至容量瓶中并定容，取水解后的溶液進行離心，收集上清液至離心管，向離心管中加入β-葡萄糖苷酶的混懸液后進行水浴加熱，得到樣品溶液C和對照品溶液C；3衍生化反應：取步驟2得到的樣品溶液A、樣品溶液B、樣品溶液C、對照品溶液A、對照品溶液B、對照品溶液C，分別加入PMP-甲醇溶液和氫氧化鈉水溶液后進行水浴加熱，然后加入鹽酸，再用三氯甲烷重復萃取多次，最后取上層水相進行離心，收集上清液過膜，得到供試品溶液A、供試品溶液B、供試品溶液C、供試品溶液A對照、供試品溶液B對照和供試品溶液C對照；4標準曲線的繪制和測定：將葡萄糖標準品加入超純水溶解，配制成1mgmL的標準儲備液，4℃保存，將標準儲備液稀釋成濃度分別為0.5、5、10、50、100、400μgmL的標準系列工作液，現用現配；將標準系列工作液分別按照步驟3進行衍生化反應；將衍生化反應后的標準系列工作液和供試品溶液A、供試品溶液B、供試品溶液C、供試品溶液A對照、供試品溶液B對照和供試品溶液C對照分別采用高效液相色譜儀進行測定，高效液相色譜條件為：色譜柱：AcclaimTMC30，5μm4.6×250mm液相色譜柱；流動相：濃度為0.1molL、pH為5.5的乙酸銨水溶液和乙腈的體積比為75:25的混合溶液；流速：1.0mLmin；柱溫：35℃；檢測器：紫外檢測器；檢測波長：254nm；進樣量：10μL；對標準系列工作液的葡萄糖目標峰進行分析得到色譜峰面積，以標準系列工作液濃度為橫坐標，以標準系列工作液的色譜峰面積為縱坐標，繪制標準曲線，獲得線性回歸方程，分別對供試品溶液A、供試品溶液B、供試品溶液C、供試品溶液A對照、供試品溶液B對照和供試品溶液C對照的葡萄糖目標峰進行分析得到色譜峰面積，通過線性回歸方程，計算出供試品溶液A、供試品溶液B、供試品溶液C、供試品溶液A對照、供試品溶液B對照和供試品溶液C對照的葡萄糖色譜峰面積對應的濃度，根據公式1-11計算待測酵母培養物樣品中酵母β-葡聚糖的含量，計算公式為：XD＝XA-XB-XC1 X酵母對照-檢測值＝XA對照-XB對照7X谷物對照-檢測值＝XC對照8 式中：XD-待測酵母培養物樣品中酵母β-葡聚糖的含量，以質量百分數表示，％；XA-供試品溶液A中總葡聚糖的含量，以質量百分數表示，％；XB-供試品溶液B中α-葡聚糖的含量，以質量百分數表示，％；XC-供試品溶液C中谷物β-葡聚糖的含量，以質量百分數表示，％；XA對照-供試品溶液A對照中總葡聚糖的含量，以質量百分數表示，％；XB對照-供試品溶液B對照中α-葡聚糖的含量，以質量百分數表示，％；X酵母對照-檢測值-供試品溶液A對照中總葡聚糖的含量減去供試品溶液B對照中α-葡聚糖的含量，即供試品溶液A對照和供試品溶液B對照中檢測到的酵母β-葡聚糖含量，以質量百分數表示，％；X谷物對照-檢測值-供試品溶液C對照中谷物β-葡聚糖的含量，即供試品溶液C對照中檢測到的谷物β-葡聚糖含量，以質量百分數表示，％；XC對照-即X谷物對照-檢測值，供試品溶液C對照中谷物β-葡聚糖的含量，即以質量百分數表示，％；cA-供試品溶液A中葡萄糖色譜峰面積對應的濃度，μgmL；cB-供試品溶液B中葡萄糖色譜峰面積對應的濃度，μgmL；cC-供試品溶液C中葡萄糖色譜峰面積對應的濃度，μgmL；cA對照-供試品溶液A對照中葡萄糖色譜峰面積對應的濃度，μgmL；cB對照-供試品溶液B對照中葡萄糖色譜峰面積對應的濃度，μgmL；cC對照-供試品溶液C對照中葡萄糖色譜峰面積對應的濃度，μgmL；mA-總葡聚糖水解稱取待測樣品的質量，g；mB-α-葡聚糖水解稱取待測樣品的質量，g；mC-谷物β-葡聚糖水解稱取待測樣品的質量，g；mA對照-總葡聚糖水解稱取酵母β-葡聚糖對照品的質量，g；mB對照-α-葡聚糖水解稱取酵母β-葡聚糖對照品的質量，g；mC對照-谷物β-葡聚糖水解稱取谷物β-葡聚糖對照品的質量，g；VA-總葡聚糖水解待測樣品定容體積，mL；VB-α-葡聚糖水解待測樣品定容體積，mL；VC-谷物β-葡聚糖水解待測樣品定容體積，mL；VA對照-總葡聚糖水解酵母β-葡聚糖對照品定容體積，mL；VB對照-α-葡聚糖水解酵母β-葡聚糖對照品定容體積，mL；VC對照-谷物β-葡聚糖水解谷物β-葡聚糖對照品定容體積，mL；F酵母-待測樣品在試驗過程中總葡聚糖和α-葡聚糖被破壞或損耗造成的結果偏低的校正因子；F谷物-待測樣品在試驗過程中谷物β-葡聚糖被破壞或損耗造成的結果偏低的校正因子；P酵母-酵母β-葡聚糖對照品的純度，％；P谷物-谷物β-葡聚糖對照品的純度，％；W酵母-酵母β-葡聚糖對照品的水分含量，％；W谷物-谷物β-葡聚糖對照品的水分含量，％；8.5-總葡聚糖水解或谷物β-葡聚糖水解收集上清液制備樣品溶液或對照品溶液，再加入PMP-甲醇溶液、氫氧化鈉水溶液和鹽酸后的上清液的體積稀釋倍數；4.25-α-葡聚糖水解收集上清液制備樣品溶液或對照品溶液，再加入PMP-甲醇溶液、氫氧化鈉水溶液和鹽酸后的上清液的體積稀釋倍數；0.9-將葡萄糖含量換算成葡聚糖含量的系數；XA對照、XB對照、XC對照和XD做多個重復測定，測定結果以多個重復測定結果的算術平均值±標準差表示，保留3位有效數字。

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