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龍圖騰網(wǎng)恭喜澳門(mén)科技大學(xué)申請(qǐng)的專(zhuān)利鉤藤中四種生物堿含量的測(cè)定方法獲國(guó)家發(fā)明授權(quán)專(zhuān)利權(quán)，本發(fā)明授權(quán)專(zhuān)利權(quán)由國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局授予，授權(quán)公告號(hào)為：CN113791100B 。

龍圖騰網(wǎng)通過(guò)國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局官網(wǎng)在2025-04-29發(fā)布的發(fā)明授權(quán)授權(quán)公告中獲悉：該發(fā)明授權(quán)的專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?專(zhuān)利號(hào)為：202110911631.9，技術(shù)領(lǐng)域涉及：G01N24/08；該發(fā)明授權(quán)鉤藤中四種生物堿含量的測(cè)定方法是由姜志宏;張偉;尹田鵬;朱國(guó)元;盧敬光設(shè)計(jì)研發(fā)完成，并于2021-08-10向國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局提交的專(zhuān)利申請(qǐng)。

本鉤藤中四種生物堿含量的測(cè)定方法在說(shuō)明書(shū)摘要公布了：本發(fā)明屬于藥物分析技術(shù)領(lǐng)域，公開(kāi)了鉤藤中四種生物堿含量的測(cè)定方法。該測(cè)定方法，包括以下步驟：1制備鉤藤總堿供試液；2向步驟1制備的鉤藤總堿供試液中加入內(nèi)標(biāo)物，然后裝入核磁管內(nèi)，進(jìn)行定量核磁共振氫譜測(cè)試，分別對(duì)內(nèi)標(biāo)物和四種生物堿的選定信號(hào)進(jìn)行積分；3利用公式進(jìn)行計(jì)算，分別得出四種生物堿在鉤藤總堿中的含量。本發(fā)明采用定量氫核磁分析技術(shù)對(duì)鉤藤中四種生物堿含量進(jìn)行測(cè)定，不需要以標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品制備工作曲線，使用已知普通化學(xué)物質(zhì)為參比即可，能夠大大節(jié)省測(cè)試成本；且樣品測(cè)試前處理簡(jiǎn)單，測(cè)試時(shí)間短，測(cè)定結(jié)果具有良好的線性、靈敏度、精密度和準(zhǔn)確度。

本發(fā)明授權(quán)鉤藤中四種生物堿含量的測(cè)定方法在權(quán)利要求書(shū)中公布了：1.鉤藤中四種生物堿含量的測(cè)定方法，所述四種生物堿為鉤藤堿、異鉤藤堿、柯諾辛堿和異柯諾辛堿，其特征在于，包括以下步驟：1取鉤藤樣品制備鉤藤總堿供試液；2向步驟1制備的鉤藤總堿供試液中加入內(nèi)標(biāo)物，進(jìn)行定量核磁共振氫譜測(cè)試，分別對(duì)所述內(nèi)標(biāo)物和所述四種生物堿的選定信號(hào)進(jìn)行積分；3利用公式CX＝100％×SX×mI.S×MXSI.S×MI.S×mTA計(jì)算，分別得出待測(cè)生物堿在鉤藤總堿中的含量；其中：CX是待測(cè)生物堿在鉤藤總堿中的含量，SX和SI.S分別是所述鉤藤樣品中待測(cè)生物堿和內(nèi)標(biāo)物定量峰的積分面積，MX和MI.S分別是所述鉤藤樣品中待測(cè)生物堿和內(nèi)標(biāo)物定量峰的摩爾分子量，mTA和mI.S分別是所述鉤藤樣品中鉤藤總堿和內(nèi)標(biāo)物的質(zhì)量；在步驟1中，制備鉤藤總堿供試液的過(guò)程為：將鉤藤樣品粉碎，采用酸溶液提取，然后調(diào)節(jié)pH為堿性，再用有機(jī)溶劑萃取，干燥，制得鉤藤總堿，最后將所述鉤藤總堿溶于氘代溶劑中，制得鉤藤總堿供試液；在步驟2中，采用t1ir脈沖確定各定量峰的縱向弛豫時(shí)間，所述鉤藤堿、異鉤藤堿、柯諾辛堿和異柯諾辛堿的縱向弛豫時(shí)間分別為0.99s、0.99s、1.40s、1.11s，所述內(nèi)標(biāo)物的縱向弛豫時(shí)間為2.33s；步驟2中所述選定信號(hào)為NH信號(hào)，并以所述NH信號(hào)為定量峰，二維HMBC譜進(jìn)一步顯示以上NH具有專(zhuān)屬性，作為定量峰；在步驟2中，在DMSO-d6中，所述鉤藤堿、異鉤藤堿、柯諾辛堿和異柯諾辛堿的NH信號(hào)峰分別位于δH10.11s、δH10.32s、δH10.13s和δH10.33s；在步驟2中，核磁共振波譜測(cè)試的參數(shù)為：偏轉(zhuǎn)角＝90°，弛豫延遲時(shí)間＝10s，時(shí)域數(shù)據(jù)長(zhǎng)度＝65536，掃描次數(shù)＝64，譜寬＝16.0221ppm，采樣時(shí)間＝3.408s，探針溫度＝300K。

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