恭喜南方醫科大學珠江醫院;南方醫科大學接力剛獲國家專利權
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龍圖騰網恭喜南方醫科大學珠江醫院;南方醫科大學申請的專利巨核細胞條件性敲除TYMP基因小鼠模型的構建方法及其應用獲國家發明授權專利權,本發明授權專利權由國家知識產權局授予,授權公告號為:CN114410629B8 。
龍圖騰網通過國家知識產權局官網在2025-03-21發布的發明授權授權公告中獲悉:該發明授權的專利申請號/專利號為:202210008011.9,技術領域涉及:C12N15/113;該發明授權巨核細胞條件性敲除TYMP基因小鼠模型的構建方法及其應用是由接力剛;杜紅延;張玉萍;朱小彤;劉丹丹設計研發完成,并于2022-01-05向國家知識產權局提交的專利申請。
本巨核細胞條件性敲除TYMP基因小鼠模型的構建方法及其應用在說明書摘要公布了:本發明公開了巨核細胞條件性敲除TYMP基因小鼠模型的構建方法及其應用,涉及生物技術領域。巨核細胞條件性敲除TYMP基因小鼠模型的構建方法為基于CRISPRCas9系統特異性敲除巨核細胞TYMP基因,敲除位點為TYMP基因的第2外顯子序列上游和第4外顯子序列下游。通過該方法構建的巨核細胞條件性敲除TYMP基因小鼠模型能夠存活五個月以上,在篩選抑制血小板活化相關藥物和研究血栓和炎癥相關疾病的分子機制方面具有很好的應用前景。
本發明授權巨核細胞條件性敲除TYMP基因小鼠模型的構建方法及其應用在權利要求書中公布了:1.巨核細胞條件性敲除TYMP基因小鼠模型的構建方法,其特征在于,包括以下步驟:S1:設計并體外轉錄gRNA,同時對TYMP基因進行flox修飾,構建DonorDNA;步驟S1中,對TYMP基因進行flox修飾具體為在TYMP基因的第2-4外顯子序列兩端插入LoxP序列;步驟S1中,所述gRNA包括gRNA1和gRNA2;其中,所述gRNA1序列如SEQIDNO.l所示,所述gRNA2序列如SEQIDNO.2所示;步驟S1中,所述DonorDNA的序列核苷酸序列如SEQIDNO.19所示;S2:將gRNA、DonorDNA和Cas9蛋白共同注射入小鼠受精卵后,將受精卵植入假孕母鼠子宮內,生產得到的F0代小鼠與野生型小鼠交配,得到的F1代條件性敲除TYMP基因的雜合子小鼠;S3:然后將F1代條件性敲除TYMP基因的雜合子小鼠相互交配,得到F2代條件性敲除TYMP基因的純合子小鼠;S4:然后將F2代條件性敲除TYMP基因的純合子小鼠與巨核細胞特異表達Cre的PF4-Cre鼠交配,得到F3代巨核細胞條件性敲除TYMP基因雜合子小鼠;S5:然后將F3代巨核細胞條件性敲除TYMP基因小鼠相互交配,得到F4代巨核細胞條件性敲除TYMP基因純合子小鼠。
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